糖尿病足溃疡 （DFUs）是糖尿病患者常见的并发症之一，其治疗难度大、复发率高，一直是医学界关注的重点。近年来，随着再生医学的发展，间充质干细胞外泌体因其独特的生物学特性和治疗潜力备受关注。作为一种新型的生物活性分子，干细胞外泌体具有促进细胞增殖、分化、迁移和血管生成等多种生物功能，为糖尿病创面的治疗提供新的思路和方法。然而，外泌体在体内的稳定性和传递效率有限，限制其在临床治疗中的应用。水凝胶作为一种生物相容性好、可降解的材料，能够为干细胞外泌体提供一个稳定的微环境，并促进其向伤口部位释放。通过优化水凝胶的制备工艺和改性方法，可以进一步提高其载药量和稳定性，从而增强治疗效果。同时，水凝胶的黏附性和可塑性也使其能够紧密贴合伤口表面，减少感染风险，加速伤口愈合过程。本文综述了负载干细胞外泌体水凝胶在DFUs 治疗中的研究进展，包括DFUs 难以愈合的机制、干细胞外泌体的功能、水凝胶的特点及功能，以及负载外泌体水凝胶促进DFUs愈合的研究进展。

目的

本研究旨在分析肾移植术后BKV 肾病免疫细胞浸润情况及关键基因。

方法

从GEO 数据库中获取17 例肾移植后肾组织活检微阵列芯片数据，通过PCA 降维分析、差异表达分析、富集分析、PPI 网络构建与关键基因筛选以及免疫细胞浸润分析等方法并利用wilcoxon 秩和检验和Spearman 相关性分析等统计学方法，探讨BKV 肾病免疫细胞浸润的模式和关键基因，并进一步通过外部数据集GSE75693 进行验证。

结果

研究发现，BKV 肾病活检样本与正常肾移植活检样本和BKV 血症肾组织活检样本在基因表达模式上表现出明显的分离。免疫细胞浸润分析揭示了BKV 相关肾病中的免疫细胞特征，特别是浆细胞、静息肥大细胞、调节性T 细胞和活化NK 细胞比例降低 （P ＜ 0.05），而静息CD4 记忆T 细胞、记忆B 细胞、活化CD4 记忆T 细胞以及静息NK 细胞比例升高 （P ＜ 0.05）。差异表达基因的识别、GO 与KEGG分析以及PPI 网络构建与Hub 基因筛选，揭示了KIF11、DLGAP5、CDK1、CDC20、BUB1、ASPM、KIF20A、BUB1B、TOP2A 和NUSAP1 等关键基因与特定免疫细胞类型的浸润比例呈现出不同程度的相关性 （|r|≥ 0.483，P ＜ 0.05），这些关键基因在BKV 肾病活检样本中表达均上调（|log₂ fold change| ≥1，P ＜ 0.001）。外部数据集验证结果显示，TOP2A、CDC20 以及KIF20A 在BKV 肾病活检样本中上调 （P ＜ 0.05）。

结论

本研究揭示BKV 肾病的免疫细胞浸润模式和分子特征，为理解BKV 肾病的发病机制提供新的视角，并可能为未来的治疗策略提供潜在的靶点。

目的

基于文献计量学方法对结直肠癌铁死亡相关研究进行可视化分析，探讨2017 年至2024 年该领域的研究热点及发展趋势。

方法

检索Web of Science 核心合集数据库、中国知网 （CNKI）、万方数据库和维普数据库2017 年1 月1 日至2024 年12 月31 日发表的相关文献，利用CiteSpace 6.4.R1 和Microsoft Excel 2016 进行发文量、国家、机构、期刊和关键词的可视化分析，以及关键词共现和聚类分析。

结果

共纳入739 篇文献，其中英文文献598 篇，中文文献141 篇。分析结果表明，2017 年至2019 年论文发表量相对较低，但自2020 年起，相关研究的发文量增加。在全球范围内，中国是发文量最多的国家；复旦大学为发文量最高的机构；《Frontiers in Oncology》为发表此类研究最多的期刊。通过关键词共现和聚类分析，揭示4 个核心研究主题，包括铁死亡的分子机制与代谢调控、铁死亡相关基因的表达与信号通路的调控、铁死亡与肿瘤免疫调控机制及基于铁死亡的临床治疗策略与干预措施。关键词突现分析表明，铁死亡调控机制和代谢调节是该领域持续的研究热点。近年来，研究焦点逐渐转向临床应用，特别关注内质网应激、干细胞技术、光动力治疗和炎症反应的研究。

结论

结直肠癌铁死亡研究正处于快速发展阶段。对结直肠癌中铁死亡机制的探讨及其临床应用，是目前的研究热点和新兴研究方向。

目的

探究施旺细胞衍生的细胞外囊泡 （SCs-EVs）对牙髓再生的影响及其可能机制。

方法

体外分离培养人牙髓干细胞 （hDPSCs），分别用SCs-EVs、SCs-EVs 联合Wnt/ β-catenin 信号通路抑制剂IWR-1 处理 （SCs-EVs 组、SCs-EVs+IWR-1 组），另设置空白对照组。CCK-8 法检测细胞增殖活性，平板克隆法检测细胞克隆形成能力，茜素红染色法检测细胞钙结节形成能力，油红O 染色法检测细胞中脂质形成能力，RT-qPCR 法检测细胞中自我更新标志基因 （Oct4、Nanog、Sox2）、成骨分化标志基因 （ALP、Runx2、COL-1）、成脂分化标志基因 （ADPN、FABP4、LPL）和成神经分化标志基因 （Gfap、Nestin、Tubb3）mRNA 表达水平，Western blot 法检测细胞中Runx2、ADPN、Nestin 及Wnt/β-catenin 信号通路蛋白表达水平，免疫荧光检测β-catenin 荧光强度。两组间比较采用独立样本t 检验或校正t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t 检验 （不同SCs-EVs 浓度组间；SCs-EVs 组与Control 组；SCs-EVs+IWR-1 组与SCs-EVs 组）。

结果

与空白对照相比，SCs-EVs 组细胞增殖活性增强 （P ＜ 0.05），同时，克隆团数量 （909.17 ± 52.86 比415.38 ± 25.61）、钙结节形成能力 （0.79 ± 0.05 比0.24 ± 0.02）、脂质形成能力 （0.52 ± 0.03 比0.14 ± 0.01），Oct4、Nanog、Sox2、ALP、Runx2、COL-1、ADPN、FABP4、LPL、Gfap、Nestin 和Tubb3 mRNA 表达水平，Runx2 （1.05 ±0.16 比0.18 ± 0.05）、ADPN （0.91 ± 0.09 比0.14 ± 0.04）、Nestin （0.96 ± 0.13 比0.15 ± 0.03）和β-catenin （1.01 ± 0.12 比0.19 ± 0.03）蛋白表达水平及β-catenin 荧光强度 （4.27 ± 0.31 比1.07 ±0.12）均升高 （P 均 ＜ 0.05）。与SCs-EVs 组比较，SCs-EVs+IWR-1 组细胞增殖活性减弱，同时，克隆团数量 （482.55 ± 29.32 比909.17 ± 52.86）、钙结节形成能力 （0.32 ± 0.03 比0.79 ± 0.05）、脂质形成能力 （0.20 ± 0.01 比0.52 ± 0.03），Oct4、Nanog、Sox2、ALP、Runx2、COL-1、ADPN、FABP4、LPL、Gfap、Nestin 和Tubb3 mRNA 表达水平，Runx2 （0.21 ± 0.05 比1.05 ± 0.16）、ADPN （0.37 ± 0.06 比0.91 ± 0.09）、Nestin （0.34 ± 0.09 比0.96 ± 0.13）和β-catenin （0.31 ± 0.05比1.01 ± 0.12）蛋白表达水平及β-catenin 荧光强度 （1.29 ± 0.15 比4.27 ± 0.31）均降低 （P 均 ＜0.05）。

结论

SCs- EVs 可促进牙髓再生，其机制可能是通过激活Wnt/β-catenin 信号通路促进hDPSCs 增殖、自我更新和多能性实现的。

目的

探讨以多黏菌素B 为基础联合其他抗生素治疗造血干细胞移植术后重症感染患者的临床疗效。

方法

回顾性分析58 例使用多黏菌素B 联合其他抗生素治疗造血干细胞移植术后重症感染患者的临床相关资料。按照多黏菌素B 治疗的持续用药时间分组，分为≤7 d 组 （27 例）和＞ 7 d 组 （31 例）。比较各组患者细菌总清除率、治疗有效率的差异。两组间定量数据的比较采用独立样本t 检验或Mann-Whitney U 检验，两组间定性数据的比较采用χ² 检验或Fisher 精确检验法。两组间生存数据的比较采用Kaplan-Meier 生存曲线法。

结果

治疗持续时间＞ 7 d 组治疗后细菌清除率 （48.39 % 比22.22 %）、治疗有效率 （70.97 %比44.44 %）较≤7 d 组升高，且两组上述指标比较差异有统计学意义 （P 均 ＜ 0.05）。

结论

对于造血干细胞移植术后重症感染患者，多黏菌素B 应足疗程与其他抗感染药物联合使用，可能更有利于患者获益。

目的

探讨人脐带间充质干细胞外泌体 （hucMSC-Exo）在体内、外抑制肝星状细胞 （HSCs）活化及改善肝纤维化的效应。

方法

外泌体提取和纯化采用高速离心法，用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析仪、Western blot 法对外泌体进行表征。在体实验选用雄性C57BL/6J小鼠为实验对象，分为4 组：正常对照组、模型组、hucMSC-Exo 干预组和秋水仙碱干预组，每组10 只。肝纤维化小鼠模型制备采用CCl₄-橄榄油（1 ： 3）混合液灌胃法，2 次/周，共8 周。治疗组于4 周 末在造模基础上实施外泌体尾静脉注射 （300 μg/100 g 体质量）和秋水仙碱灌胃（0.01 mg/100 g 体质量）干预。8 周末取材，生化分析法检测血清中丙氨酸氨基转移酶 （ALT）、天冬氨酸氨基转移酶 （AST），酶联免疫法检测Ⅳ型胶原 （Collagen-Ⅳ）、层粘连蛋白 （LN）、Ⅲ型前胶原 （PC-Ⅲ）及透明质酸 （HAase）水平，HE 和Masson 法检测肝组织病理变化，免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白 （α-SMA）和I 型胶原 （Collagen-Ⅰ）表达。离体实验选用人肝星形细胞系LX-2 细胞为实验对象，分3 组：空白对照组、转化生长因子-β₁ （TGF-β₁）诱导组和TGF-β₁ 诱导+ hucMSC-Exo 干预组，采用免疫荧光法检测各组细胞α-SMA 的表达，Western blot检测各组细胞内α-SMA 和Collagen-Ⅰ蛋白水平。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t 检验。

结果

小鼠血清生化分析结果表明，与正常对照组比较，模型组ALT、AST、Collagen-Ⅳ、LN 和HAase 水平均升高 （P 均＜ 0.01）。与模型组比较，hucMSC-Exo 干预 组ALT[（3.17 ± 0.70）比 （6.34 ± 0.37） U/L］，AST [（2.91 ± 0.60）比 （7.11 ± 0.41）U/L］，Collagen-Ⅳ [（116.38 ± 4.96）比 （143.79 ± 6.71） μg/L］，LN [（762.96 ± 120.45）比（950.86 ±29.77） μg/L］，PC-Ⅲ[（14.88 ± 0.83）比 （18.39 ± 2.57） μg/L］，HAase [（109.92 ± 11.32）比（187.58 ± 10.42） ng/L］均降低，差异具有统计学意义 （P 均＜ 0.01）。肝组织免疫组化结果显示：与正常对照组比较，模型组α-SMA 和Collagen-Ⅰ表达水平均增高 （P 均 ＜ 0.01）。与模型组比较，hucMSC-Exo 干预组肝组织中α-SMA （337.05 ± 39.13 比2 681.83 ± 312.63）及Collagen-Ⅰ（479.32 ± 86.25 比1 022.57 ± 102.13）表达水平均降低，差异有统计学意义 （P 均 ＜ 0.01）；LX-2细胞裂解液Western blot 检测结果提示：与模型组比较，hucMSC-Exo 干预组α-SMA 蛋白 （0.87 ±0.09 比1.01 ± 0.34）及Collagen-Ⅰ （0.46 ± 0.07 比0.75 ± 0.22）蛋白表达均下降，差异具有统计学意义 （P 均 ＜ 0.05）。

结论

早期移植hucMSC-Exo 能抑制CCl₄ 诱导小鼠肝纤维化病理进程，其初步作用机制与hucMSC-Exo 抑制肝星状细胞的活化和胶原蛋白的合成、分泌相关。

干细胞作为生物医学领域新质生产力的代表，具有巨大的发展潜力和广阔的应用前景。鉴于干细胞的特殊性和复杂性，各国政府和相关监管机构纷纷加大对干细胞治疗领域的监管力度，力求在确保患者安全的前提下，推动该领域的健康发展。在这一背景下，对干细胞治疗国内外监管政策与技术规范进行深入的研究和探讨，具有重要的理论意义和现实意义。本文通过对比不同国家和地区的监管模式，分析国内外相关指导原则，探讨我国干细胞监管面临的挑战，并提出对干细胞监管体系完善的启示，旨在为干细胞的安全、有效和合规应用提供有益的参考。

目的

探究锌指E-盒结合同源盒1 （ZEB1）是否通过调控Wnt/β-catenin 信号通路促进前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

方法

向前列腺癌细胞PC-3、LNCaP 中转染siZEB1和Wnt3a 过表达质粒，依次分为对照，siZEB1 组和siZEB1+OE-Wnt3a 组。实时荧光定量聚合酶链式反应 （RT-qPCR）检测人正常前列腺上皮细胞RWPE1 和前列腺癌细胞PC-3、LNCaP 中ZEB1、Wnt3a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、E-cadherin 及N-cadherin mRNA 表达量；Western blot 检测前列腺癌细胞PC-3、LNCaP 中Wnt3a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、E-cadherin 及N-cadherin 蛋白的含量；CCK-8 实验以及平板克隆实验检测不同分组处理后的前列腺癌细胞增殖变化；划痕实验、侵袭测定 （Transwell） 实验检测不同分组处理后前列腺癌细胞的侵袭与迁移。两组间比较采用独立样本t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。

结果

与RWPE1细胞相比，前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中ZEB1 mRNA表达 （1.99 ±0.11、1.96 ± 0.13 比1.00 ± 0.05）上调 （P 均＜ 0.05）。转染siZEB1 后，与对照比较，siZEB1 组PC-3、LNCaP 细胞活性降低，克隆细胞数目[PC-3 细胞：（21.33 ± 2.05）比 （48.67 ± 3.68）个，LNCaP 细胞：（21.67 ± 2.87）比（47.33 ± 2.05）个］减少，迁移率[（30.67 ± 2.49）%比（48.33 ±2.49）%，（28.33 ± 3.40）%比 （43.00 ± 2.94）%］、侵袭数目[（43.00 ± 3.56）比 （64.00 ± 3.74）个，（42.67 ± 4.50）比 （61.33 ± 2.62）个］降低，凋亡率[（9.63 ± 0.66）% 比（1.25 ± 0.34）%，（9.34 ±0.72）% 比 （1.54 ± 0.42）%］上升 （P 均 ＜ 0.001）。转染siZEB1 后，与对照比较，siZEB1 组PC-3、LNCaP 细胞中Wnt3a、c-Myc、Cyclin D1、N-cadherin 蛋白表达和mRNA 表达、β-catenin蛋白表达下降， E-cadherin 蛋白表达和mRNA 表达上升；同时转染siZEB1 和OE-Wnt3a 后，与siZEB1 组比较，siZEB1+OE-Wnt3a 组Wnt3a、c-Myc、Cyclin D1、E-cadherin、N-cadherin 蛋白表达和mRNA 表达以及β-catenin 蛋白表达部分恢复 （P 均 ＜ 0.05）。同时转染siZEB1 和OE-Wnt3a 后，与siZEB1 组比较，siZEB1+OE-Wnt3a 组中PC-3、LNCaP 细胞活性、克隆细胞数目[PC-3 细胞：（35.67 ± 2.05）比 （18.33 ± 2.87）个，LNCaP 细胞：（31.33 ± 2.52）比 （15.00 ±3.61） 个］、迁移率[（50.67 ± 3.30）%比（43.67 ± 3.68）%，（53.67 ± 3.21）%比 （41.33 ± 5.50）%］、侵袭数目[（35.67 ± 1.24）比 （24.00 ± 2.45）个，（34.33 ± 4.04）比 （22.00 ± 3.00）个］上升，凋亡率[（6.74 ± 0.73）%比（9.75 ± 1.08）%，（8.30 ± 0.47）%比 （11.50 ± 0.56）%］降低 （P 均 ＜ 0.05）。

结论

ZEB1 通过调控Wnt/β-catenin 信号通路，在前列腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡中发挥重要作用。敲低ZEB1 可抑制前列腺癌细胞的恶性表型，而Wnt3a 的过表达能够部分逆转这种抑制作用。

目的

探讨人非小细胞肺癌细胞 （A549）和人正常肺上皮细胞（BEAS-2B）中双氢青蒿素 （DHA）抗甲型流感病毒 （H1N1）感染的作用机制。

方法

用不同浓度的DHA 分别作用于A549 和BEAS-2B 细胞24 h，计算DHA 在2 种细胞中的CC₅₀ 值。用H1N1 感染A549细胞3 h 后，给予不同浓度的DHA （0.1、1 和10 μmol/L）处理24 h，用CCK-8 法检测细胞活性。采用空斑实验检测DHA 抑制H1N1 复制作用。用代谢组学分析H1N1 感染后，DHA 引起的差异代谢物，并对差异代谢物进行KEGG 通路富集图等分析。用试剂盒检测细胞内还原型谷胱甘肽 （GSH）和氧化型谷胱甘肽 （GSSG）含量、细胞内活性氧 （ROS）和线粒体功能。Western blot检测RIG1、MAVS、p-TBK1 和p-IRF3 蛋白表达，实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法和酶联免疫吸附试验 （ELISA）分别检测IFN-α 和IFN-β mRNA 表达和分泌情况。两组间比较采用独立样本t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用Tukey 多重检验。

结果

DHA在A549 和BEAS-2B 细胞中的CC₅₀ 值分别为18.26 μmol/L 和28.61 μmol/L，且DHA 浓度为1 μmol/ L 时可以提高细胞活性并减少空斑形成。此外，DHA 通过调节谷胱甘肽代谢，抑制流感病毒感染引起的谷氨酸、甘氨酸和鸟氨酸等物质代谢，同时抑制GSH 耗竭、GSSG 和ROS 形成，并减轻线粒体损伤。DHA 作用提高RIG1 和MAVS 蛋白表达，促进MAVS 向线粒体聚集并激活下游TBK1 及IRF3 蛋白磷酸化，上调IFN-α 和IFN-β mRNA 表达水平，并促进其蛋白分泌。

结论

DHA 通过调节细胞内谷胱甘肽稳态、减少ROS 形成、减轻线粒体损伤并增强天然免疫应答发挥抗流感病毒作用。

目的

探讨羟基磷灰石磷酸三钙 （HA-TCP）支架复合体与牙周膜干细胞对牙周组织再生的影响。

方法

收集15 例需要矫正治疗的16 ～ 18 岁患儿健康前磨牙，分离人牙周膜干细胞 （hPDLSCs）并鉴定。用克隆形成实验检测hPDLSCs 自身复制能力；流式细胞仪检测hPDLSCs 表面抗原CD90、CD44、CD34、CD45 表达；茜素红和红油O 染色检测hPDLSCs 的成骨和成脂能力；碱性磷酸酶 （ALP）染色检测碱性磷酸酶活性；制备hPDLSCs 与HA-TCP 复合体。建立大鼠牙槽骨缺损模型，随机将大鼠分为NC 组 （无复合体植入）、HA-TCP 组 （仅植入HA-TCP）和hPDLSCs/HA-TCP 组 （植入hPDLSCs/HA-TCP 复合体），每组10 只。HE 染色检测牙槽骨组织病理学变化；Western blot 检测牙槽骨组织中ALP、骨钙素 （OCN）和骨桥蛋白（OPN）蛋白表达。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t 检验。

结果

结晶紫染色可见hPDLSCs 能够形成克隆集落，镜下可见克隆集落状态，提示hPDLSCs 具有自我复制能力。流式图结果可见，hPDLSCs 表面显示出高水平的间充质干细胞标志物CD90 和CD44，而造血干细胞标志物CD45 和CD34 低表达，提示所提取PDLSCs 即为间充质干细胞茜素红和红油O 染色发现hPDLSCs 有骨结节、钙盐矿化结节和脂滴形成。HE 染色结果显示，hPDLSCs/HA-TCP 促进成熟的新生骨、新生血管和成骨细胞形成；ALP 染色发现阳性细胞数增多。Western blot 结果显示，与NC 组相比，HA-TCP 组和hPDLSCs/HA-TCP 组牙槽骨组织中ALP （0.63 ± 0.08、1.21 ± 0.13 比0.32 ± 0.05）、OCN （0.61 ± 0.08、1.10 ± 0.12 比0.23 ± 0.04）和OPN 蛋白 （0.53 ± 0.07、0.82 ± 0.10 比0.20 ± 0.04）表达均增加，且hPDLSCs/HA-TCP 组牙槽骨组织中ALP、OCN 和OPN 蛋白表达高于HA-TCP 组 （P ＜ 0.05）。

结论

HA-TCP 支架能促进PDLSCs 成骨能力，从而修复牙槽骨缺失，促进骨组织再生。

目的

探讨阿托伐他汀对高脂饮食诱导的新西兰兔代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MAFLD）中巨噬细胞极化的作用及其相关机制。

方法

从GEO 数据库下载健康人群和MAFLD 患者的单细胞数据集。将15 只雄性新西兰兔分为正常组 （NCG）、高脂饮食组 （MCG）、高脂饮食+阿托伐他汀组 （PCG）。正常组给予基础饲料，其余各组给予高脂饲料。阿托伐他汀剂量为4 mg/ （kg·d）。8 周后，油红O 染色检测各组肝脏脂肪沉积的差异；Western blot 检测肝组织中Toll 样受体4/核因子κB （TLR4/NF-κB）的蛋白表达水平；流式细胞仪检测新西兰兔外周血中巨噬细胞亚型的比例。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用 Bonferroni法进行校正。

结果

单细胞数据分析结果提示TLR4 在MAFLD 患者的巨噬细胞各亚型中均有表达，且与M2 型巨噬细胞极化相关。与NCG 组比较，MCG 组新西兰兔在高脂饮食喂养8周后，油红O 染色检测发现肝脏脂肪沉积增多；TLR4 蛋白的表达水平 （0.68 ± 0.08）比（0.37 ±0.06）、NF-κB 蛋白的表达水平 （1.81 ± 0.14）比（1.27 ± 0.13） 升高，差异具有统计学意义 （P 均 ＜0.001）。阿托伐他汀治疗后，PCG 组新西兰兔肝脏脂肪沉积减少；TLR4 蛋白的表达水平 （0.58 ±0.08）比 （0.68 ± 0.08）、NF-κB 蛋白的表达水平 （1.60 ± 0.14）比 （1.80 ± 0.14）降低；外周血中M2 巨噬细胞比例[（2.22 ± 0.16）%比 （0.42 ± 0.05）%］升高，差异具有统计学意义 （P 均 ＜0.001）。

结论

外周血巨噬细胞亚型与MAFLD 病情相关。阿托伐他汀可以减少高脂饮食诱导的新西兰兔肝脏脂肪沉积，调控外周血M1/M2 巨噬细胞极化和肝脏内TLR4/NF-κB 信号通路表达，参与肝脏炎症损伤的修复。

目的

探讨纳米金棒 （AuNRs）对A549 细胞的生物毒性效应及其可能机制。

方法

将正常培养A549 细胞分别给予0、0.5、1、2、4 μg/mL AuNRs 处理6、12、24 h 后进行检测。使用CCK-8 实验、LDH 实验分别观察细胞活力与细胞膜损伤；使用透射电镜观察AuNRs 在细胞内的分布和细胞形态；使用Western blot 检测自噬相关蛋白ATG16、ATG4、Beclin1、LC3- Ⅱ、P62 的表达；使用激光扫描共聚焦显微镜检测ROS；使用试剂盒检测GSH/GSSG、T-AOC。数据方差齐性检验后进行单因素方差分析；组间两两比较采用Student-Newman-Keuls 检验。

结果

CCK-8 实验结果表明，与0 μg/mL 相比，4 μg/mL AuNRs 处理A549 细胞6 h 后细胞活力[（80.05 ± 3.45）%比 （100 ± 2.47%）］降低 （P ＜ 0.01）；2、4 μg/mL AuNRs 处理A549 细胞12 h 后细胞活力[（71.36 ± 3.87）%、（39.47 ± 4.16）%比 （100 ± 3.12）%］降低 （P ＜ 0.01）；1、2、4 μg/ mL AuNRs 处理A549 细胞24 h 后细胞活力[（91.83 ± 1.98）%、（56.53 ± 3.57）%、（28.65 ±3.09）%比 （100 ± 2.34）%］降低 （P ＜ 0.01）。LDH 实验表明，细胞LDH 渗漏增加且具有统计学意义 （P ＜ 0.01）。4 μg/mL AuNRs 处理6 h 后，透射电镜观察发现AuNRs 能够进入A549 细胞并以单个颗粒或聚集体形式存于细胞质和部分膜囊泡中。Western blot 结果表明，分别用0、0.5、1、2、4 μg/mL AuNRs 处理A549 细胞6 h 后，ATG16、ATG4、Beclin1 和LC3-Ⅱ蛋白表达增加，而自噬底物蛋白P62 表达降低 （P ＜ 0.01）。给予100 μmol/L MnTBAP 或10 mmol/L NAC 处理，AuNRs 引起细胞ROS 和LC3 表达增加能够被逆转，同时T-AOC [（92.37 ± 8.49）%比 （68.46 ±6.38）%，（110.49 ± 7.39）%比 （51.26 ±7.39）%］、GSH/GSSG[（92.56 ± 5.52）%比 （62.48 ±5.52）%，（104.49 ± 4.84）%比 （57.39 ± 4.84）%］水平升高 （P 均 ＜ 0.05）。

结论

AuNRs 能够进入A549 细胞引发细胞毒性效应，且细胞毒性效应呈剂量、时间依赖性增加，其机制可能与AuNRs 导致A549 细胞抗氧化应激能力降低进而引起细胞自噬有关。

目的

探讨染色体结构维持蛋白4 （SMC4）对低氧性人源肺动脉平滑肌（hPASMC）焦亡的影响及调控机制。

方法

以hPASMCs 为实验对象，将细胞随机分为常氧组、低氧组、低氧+NC 组、低氧+si-SMC4 组，除常氧组细胞在37℃、5%CO₂ 条件下培养外，低氧组及低氧+si-SMC4 组均在3%O₂，5%CO₂ 限制条件下培养24 h 建立低氧模型。使用Western blot 检测SMC4、以及焦亡相关蛋白，如白介素1β、GSDMD、GSDMD-N、NOD 样受体蛋白3（NLRP3）的表达水平；利用乳酸脱氢酶 （LDH）释放实验检测细胞培养液中分泌的LDH 释放量；利用细胞免疫荧光DAPI/PI 双染检测焦亡细胞比例。大鼠分为常氧组和10%O₂ 浓度低氧组，用血压监测及HE 染色判断动物模型是否成功，组织免疫荧光用于检测SMC4 组织定位，Western blot 检测各组织器官SMC4 的差异表达，两组间比较采用独立样本t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q 检验。

结果

与常氧组相比，低氧组大鼠肺组织SMC4 蛋白表达量升高 （0.86 ± 0.06 比0.75 ± 0.05，P ＜ 0.05），SMC4 定位在肺血管平滑肌层；与常氧组比较，低氧组肺动脉[（30.33 ± 3.49）比 （13.52 ± 2.34）μm］增厚、NEMO （0.77 ± 0.14比0.31 ± 0.09）、细胞焦亡相关蛋白NLRP3 （1.04 ± 0.15 比0.54 ± 0.22）、GSDMD （1.34 ± 0.32 比0.86 ± 0.34）、GSDMD-N （0.90 ± 0.11 比0.45 ± 0.02）、IL-1β （3.15 ± 0.56 比0.53 ± 0.06）表达、LDH 释放量百分比 （71.69 ± 10.36 比19.94 ± 3.54）、PI 阳性细胞 （4.81 ± 0.64 比2.18 ± 0.31）均升高 （P ＜ 0.05）。低氧+si-SMC4 组可以逆转上述影响。

结论

SMC4 在低氧性肺动脉高压中上调，激活细胞焦亡相关蛋白表达，增加hPASMCs LDH 释放及PI 阳性细胞比例，敲低SMC4 后，上述改变得到逆转可能与NEMO 调控相关。

间充质干细胞制备的纳米囊泡 （MSCNVs）作为一种新型的细胞治疗替代方案，具有稳定性高和体积小等优势，其应用前景已在神经系统疾病、心血管疾病、炎症性疾病和组织再生修复等多个领域得到证实。研究表明，纳米囊泡 （NVs）通过促进组织再生、减轻炎症反应和调节免疫应答等机制，在疾病的治疗和组织修复中发挥积极作用。然而，目前MSCNVs 在疾病应用中仍面临有效性和长期安全性等挑战，需进一步研究改进。本综述引用最新的研究成果和试验数据，系统性分析MSCNVs 在多种疾病治疗中的应用和疗效，以全面且更新的视角展望MSCNVs 在疾病治疗中的潜在价值。

【视频简介】 干细胞作为再生医学的核心资源，其质量与稳定性直接决定临床疗效与安全性。本报告从干细胞分类、国内应用现状、质控体系及稳定性研究四方面展开，系统阐述研究设计要点：（1）干细胞分类与国内应用；（2）质量控制核心要点；（3）稳定性研究设计；（4）法规与标准。

干细胞技术的突破依赖严谨的质量控制与稳定性研究。通过标准化流程、创新检测技术及国际化法规衔接，我国干细胞产业将加速迈向临床转化与产业化，引领未来医学革新。

目的

探讨过表达骨膜蛋白 （POSTN）的间充质干细胞 （MSCs）来源外泌体对肝再生的促进作用及其机制。

方法

切除小鼠70 %的肝脏构建小鼠肝部分切除模型，术后通过尾静脉分别注射PBS （PBS 组）、MSCs 外泌体 （MSC-Exo 组）和过表达POSTN 的MSCs 外泌体 （MSC-Exo^POSTN 组）。收集各组小鼠肝切术后72 h 的肝组织，通过免疫荧光染色测定Ki-67 及Western blot 检测增殖细胞核抗原 （PCNA）评估肝细胞增殖情况；RT-qPCR 及Western blot 测定促再生因子［如肝细胞生长因子 （HGF）、白细胞介素-6 （IL-6）等］在肝组织mRNA 及蛋白表达水平；构建MSC-Exo^POSTN 与AML-12 肝细胞共培养体系，通过Western blot 以及RT-qPCR 测定PCNA、PI3K、p-PI3K、p65 和p-p65 表达水平。两组间比较采用独立样本t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用 LSD-t 检验。

结果

与PBS 组相比，MSC-Exo^POSTN 组肝体重比 ［（3.63 ± 0.06）%比（2.96 ± 0.08）%］、肝组织中PCNA蛋白水平 （0.62 ± 0.02比0.32 ± 0.03）、Ki-67 阳性细胞比例 ［（39.33 ± 2.87）%比 （21.03 ± 1.63）%］、肝再生因子HGF mRNA（1.66 ±0.06 比0.99 ± 0.09）、HGF 蛋白水平 （1.98 ± 0.12 比1.00 ± 0.19）、IL-6 的mRNA 表达 （1.87 ±0.07 比1.09 ± 0.12）及蛋白水平 （1.51 ± 0.04 比0.97 ± 0.07）上调；与MSC-Exo 组相比，MSCExo^POSTN 组肝体重比 ［（3.63 ± 0.06）%比（3.28 ± 0.06）%］、肝组织中PCNA 蛋白水平 （0.62 ±0.02 比0.51 ± 0.02）、Ki-67 阳性细胞比例［（39.33 ± 2.87）%比（30.33 ± 1.70）%］、HGF mRNA（1.66 ± 0.06比1.32 ± 0.10）、HGF蛋白水平 （1.98 ± 0.12比1.50 ± 0.09）、IL-6 （1.87 ± 0.07比0.77 ±0.08）的mRNA 表达及蛋白水平 （1.51 ± 0.04 比0.79 ± 0.06）上调 （P 均＜ 0.05）。MSC-Exo^POSTN与AML-12 肝细胞共培养体系中，与PBS 组相比，MSC-Exo^POSTN 组的PCNA 蛋白水平 （0.81 ±0.06 比0.32 ± 0.03）、p-p65 蛋白水平 （1.15 ± 0.10 比0.81 ± 0.14）上调（P 均＜ 0.05），p-PI3K 蛋白水平差异无统计学意义；与MSC-Exo 组相比，MSC-Exo^POSTN 组的PCNA 蛋白水平 （0.81 ± 0.06比0.49 ± 0.04）、p-p65 蛋白水平 （1.15 ± 0.10 比0.51 ± 0.07）上调 （P 均＜ 0.05），p-PI3K 蛋白水平差异无统计学意义。给予NF-κB JSH23后，与PBS组相比，JSH组的PCNA mRNA 水平 （1.01 ±0.09 比1.59 ± 0.07）下调 （P ＜ 0.05）。

结论

本研究证实MSC- Exo^POSTN 促进肝切除后肝再生并且可能是通过激活肝细胞内NF-κB 信号通路实现的。

【视频简介】 细胞外基质 （ECM）是肿瘤微环境的重要组分。实体瘤具有独特的ECM，即大部分实体瘤会形成肿瘤纤维化，而这种特征主要由ECM 中的胶原蛋白所赋予。基于胶原蛋白沉积和肿瘤浸润免疫细胞丰度，本团队将实体肿瘤分为三种亚型：软热肿瘤 （soft & hot tumor，低胶原蛋白沉积和高免疫浸润）、硬冷肿瘤 （armored & cold tumor，高胶原蛋白沉积和低免疫浸润）和静默肿瘤 （quiescent tumor，低胶原蛋白沉积和免疫浸润）。

由于硬冷肿瘤ECM 中大量胶原蛋白沉积，阻碍了免疫细胞浸润，因此硬冷肿瘤的预后较差。针对硬冷肿瘤的治疗策略有“直接靶向ECM 中已经存在的胶原蛋白”和“抑制胶原蛋白的产生”两种方式。后者的靶点包括血管生成靶点、成纤维细胞生长因子受体、血小板衍生生长因子受体、免疫检查点B7-H3等。硬冷肿瘤的防治研究尚处于起步阶段，后续工作将着力解决以下三个问题：复杂的纤维化机制、评估方法的标准化和个体差异的影响。随着研究的不断深入，未来胶原蛋白有望成为解决肿瘤免疫逃逸、预防肿瘤复发和转移等难题的有效靶点。

目的

探讨环状RNA CCDC66 （Circ-CCDC66）通过miR-618/磷酸酶和张力蛋白同源物 （PTEN）调控结直肠癌的进展的作用及其机制。

方法

收集结直肠癌组织和癌旁正常组织样本10 对，采用生物信息学方法对Circ-CCDC66 进行靶向预测，筛选出相关的miR- 618、PTEN 进行后续实验。实时荧光定量聚合酶链式反应 （RT-qPCR）检测NCM620、SW480、SW620、HCT116 细胞中 Circ- CCDC66 表达量，RNase R 处理HCT116、SW620 细胞后CCDC66和Circ-CCDC66 表达量，转染miR 618 mimic 或慢病毒载体转染Circ-CCDC66 后SW680 细胞组与HCT116 细胞组miR- 618 表达量；Western blot 检测细胞中PTEN、AKT、BCL-2 蛋白的含量；双荧光素酶报告基因检测Circ- CCDC66 与miR-618，miR-618 与PTEN 之间的靶向作用；细胞计数试剂-8（CCK-8）实验检测不同分组处理后的细胞增殖变化、划痕实验；侵袭测定（Transwell） 实验检测不同分组处理后结直肠癌细胞的侵袭与迁移。两组间比较采用独立样本t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用 LSD-t 检验。

结果

与结直肠癌旁组织相比，结直肠癌组织中Circ-CCDC66 （0.69 ± 0.20 比1.00 ± 0.21）、PTEN mRNA 表达 （0.26 ±0.13 比1.00 ± 0.48）及PTEN 蛋白表达（0.67 ± 0.23 比1.00 ± 0.13）均降低 （P 均 ＜ 0.05）。与正常结肠上皮细胞系NCM460 相比，结直肠癌细胞系HCT116、SW620、SW480 中Circ-CCDC66表达 （0.50 ± 0.03、0.18 ± 0.02、0.62 ± 0.05 比1.00 ± 0.10）降低 （P 均 ＜ 0.01），结直肠癌细胞系HCT116、SW620 细胞中Circ-CCDC66 表达量低于SW480 细胞 （P 均 ＜ 0.05）。生物信息学分析和慢病毒转染实验显示，miR-618 为Circ-CCDC66 的下游作用靶点。双荧光素酶报告实验显示miR-618 靶向作用于结直肠癌细胞系中的PTEN 基因。过表达miR-618 后，结直肠癌SW620、HCT116 细胞中PTEN 蛋白表达含量［（0.49 ± 0.01 比1.00 ± 0.01），（0.52 ± 0.00 比1.01 ±0.00）］下降 （P 均 ＜ 0.001）。CCK-8、细胞划痕和Transwell 实验显示，Circ-CCDC66 过表达能够抑制结直肠癌SW620 细胞、HCT116 细胞48 h 增殖［（0.48 ± 0.09 比0.83 ± 0.05）、（0.41 ± 0.05比0.68 ± 0.05）］、迁移［（25.33 ± 2.08）% 比 （41.00 ± 3.61）%、（28.00 ± 2.00）% 比 （40.00 ±5.00）%］和侵袭能力［（42.33 ± 4.93）比（61.33 ± 4.16） 个、（25.00 ± 5.00）比（41.00 ± 3.61）个］（P 均＜ 0.05）。而miR-618 可以逆转上述改变［增殖（0.78 ± 0.05）比 （0.48 ± 0.09）、（0.58 ± 0.05）比 （0.41 ± 0.05）；迁移 ［（35.00 ± 2.00）%比 （25.33 ± 2.08）%、（40.00 ± 1.73）%比 （28.00 ±2.00）%］；侵袭［（68.67 ± 5.03）比 （42.33 ± 4.93）个、（39.33 ± 5.13）比 （25.00 ± 5.00）个］（P均＜ 0.05）。

结论

Circ-CCDC66 通过与结直肠癌细胞中的miR-618 结合靶向PTEN，进而影响结直肠癌细胞的进展。

目的

探讨构建模拟微重力环境大鼠模型视网膜结构及炎性因子的变化，并探究NETs 是否在其中发挥作用。

方法

40 只大鼠随机分为对照组和尾悬吊组，每组各20 只，采用尾悬吊法建立大鼠失重模型，悬吊时间为4 周，HE 染色观察视网膜结构变化，OCTA 检测视网膜灌注面积和厚度。采用免疫组化的方法对两组大鼠视网膜中NETosis 相关调节因子［髓过氧化物酶（ MPO）、瓜氨酸组蛋白H3（ CIT-H3）、中性粒细胞弹性酶（ NE）］进行定性评估，并通过Western blot 定量分析模拟微重力前后NETosis 相关调节因子［MPO、蛋白精氨酸脱亚氨酶4（ PAD4）、CIT-H3和NE］。此外，采用ELISA方法定量检测促炎因子［白细胞介素-1（ IL- 1）、IL-6和肿瘤环死因子-α（ TNF-α）］及抗炎因子（ IL-10）的表达水平。两组间比较采用独立样本t 检验。

结果

与对照组比较，尾悬吊组视网膜灌注面积［0-6mm：（26.93 ± 0.18） 比（ 24.96 ± 0.26） mm²］和厚度［0-6mm：（255.42 ± 3.37）比（ 230.77 ± 4.13）μm］均升高（ P 均 ＜ 0.05），视网膜各细胞层厚度呈现不同程度增加，同时其排列变得稀疏紊乱；尾悬吊组促炎因子IL-1β ［（10.59 ± 0.31）比（ 8.25 ± 0.21）pg/（mg·pro）］，IL-6［（32.97 ± 1.11）比（ 22.89 ± 0.87） pg（/ mg·pro）］，TNF-α［（102.47 ± 4.01） 比（ 65.84 ± 3.48）pg/（ mg·pro）］水平均上升，而抗炎因子IL-10［（15.34 ± 0.35）比（21.17 ± 0.63） pg/（mg·pro）］水平降低（ P 均 ＜ 0.05）。NETosis 相关调节因子MPO（ 0.68 ±0.01 比0.27 ± 0.01），NE（ 0.50 ± 0.02 比0.18 ± 0.02）、CitH3（ 0.89 ± 0.01 比0.31 ± 0.02）和PAD4（0.61 ± 0.01 比 0.15 ± 0.02）相对表达量均升高（ P 均 ＜ 0.05）。

结论

模拟微重力环境可使大鼠视网膜结构出现病理改变，炎症水平升高，同时NETs 可能参与微重力后视网膜炎症变化过程。