目的

探讨人脐带间充质干细胞外泌体 （hucMSC-Exo）在体内、外抑制肝星状细胞 （HSCs）活化及改善肝纤维化的效应。

方法

外泌体提取和纯化采用高速离心法，用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析仪、Western blot 法对外泌体进行表征。在体实验选用雄性C57BL/6J小鼠为实验对象，分为4 组：正常对照组、模型组、hucMSC-Exo 干预组和秋水仙碱干预组，每组10 只。肝纤维化小鼠模型制备采用CCl₄-橄榄油（1 ： 3）混合液灌胃法，2 次/周，共8 周。治疗组于4 周 末在造模基础上实施外泌体尾静脉注射 （300 μg/100 g 体质量）和秋水仙碱灌胃（0.01 mg/100 g 体质量）干预。8 周末取材，生化分析法检测血清中丙氨酸氨基转移酶 （ALT）、天冬氨酸氨基转移酶 （AST），酶联免疫法检测Ⅳ型胶原 （Collagen-Ⅳ）、层粘连蛋白 （LN）、Ⅲ型前胶原 （PC-Ⅲ）及透明质酸 （HAase）水平，HE 和Masson 法检测肝组织病理变化，免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白 （α-SMA）和I 型胶原 （Collagen-Ⅰ）表达。离体实验选用人肝星形细胞系LX-2 细胞为实验对象，分3 组：空白对照组、转化生长因子-β₁ （TGF-β₁）诱导组和TGF-β₁ 诱导+ hucMSC-Exo 干预组，采用免疫荧光法检测各组细胞α-SMA 的表达，Western blot检测各组细胞内α-SMA 和Collagen-Ⅰ蛋白水平。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t 检验。

结果

小鼠血清生化分析结果表明，与正常对照组比较，模型组ALT、AST、Collagen-Ⅳ、LN 和HAase 水平均升高 （P 均＜ 0.01）。与模型组比较，hucMSC-Exo 干预 组ALT[（3.17 ± 0.70）比 （6.34 ± 0.37） U/L］，AST [（2.91 ± 0.60）比 （7.11 ± 0.41）U/L］，Collagen-Ⅳ [（116.38 ± 4.96）比 （143.79 ± 6.71） μg/L］，LN [（762.96 ± 120.45）比（950.86 ±29.77） μg/L］，PC-Ⅲ[（14.88 ± 0.83）比 （18.39 ± 2.57） μg/L］，HAase [（109.92 ± 11.32）比（187.58 ± 10.42） ng/L］均降低，差异具有统计学意义 （P 均＜ 0.01）。肝组织免疫组化结果显示：与正常对照组比较，模型组α-SMA 和Collagen-Ⅰ表达水平均增高 （P 均 ＜ 0.01）。与模型组比较，hucMSC-Exo 干预组肝组织中α-SMA （337.05 ± 39.13 比2 681.83 ± 312.63）及Collagen-Ⅰ（479.32 ± 86.25 比1 022.57 ± 102.13）表达水平均降低，差异有统计学意义 （P 均 ＜ 0.01）；LX-2细胞裂解液Western blot 检测结果提示：与模型组比较，hucMSC-Exo 干预组α-SMA 蛋白 （0.87 ±0.09 比1.01 ± 0.34）及Collagen-Ⅰ （0.46 ± 0.07 比0.75 ± 0.22）蛋白表达均下降，差异具有统计学意义 （P 均 ＜ 0.05）。

结论

早期移植hucMSC-Exo 能抑制CCl₄ 诱导小鼠肝纤维化病理进程，其初步作用机制与hucMSC-Exo 抑制肝星状细胞的活化和胶原蛋白的合成、分泌相关。

目的

基于文献计量学方法对结直肠癌铁死亡相关研究进行可视化分析，探讨2017 年至2024 年该领域的研究热点及发展趋势。

方法

检索Web of Science 核心合集数据库、中国知网 （CNKI）、万方数据库和维普数据库2017 年1 月1 日至2024 年12 月31 日发表的相关文献，利用CiteSpace 6.4.R1 和Microsoft Excel 2016 进行发文量、国家、机构、期刊和关键词的可视化分析，以及关键词共现和聚类分析。

结果

共纳入739 篇文献，其中英文文献598 篇，中文文献141 篇。分析结果表明，2017 年至2019 年论文发表量相对较低，但自2020 年起，相关研究的发文量增加。在全球范围内，中国是发文量最多的国家；复旦大学为发文量最高的机构；《Frontiers in Oncology》为发表此类研究最多的期刊。通过关键词共现和聚类分析，揭示4 个核心研究主题，包括铁死亡的分子机制与代谢调控、铁死亡相关基因的表达与信号通路的调控、铁死亡与肿瘤免疫调控机制及基于铁死亡的临床治疗策略与干预措施。关键词突现分析表明，铁死亡调控机制和代谢调节是该领域持续的研究热点。近年来，研究焦点逐渐转向临床应用，特别关注内质网应激、干细胞技术、光动力治疗和炎症反应的研究。

结论

结直肠癌铁死亡研究正处于快速发展阶段。对结直肠癌中铁死亡机制的探讨及其临床应用，是目前的研究热点和新兴研究方向。

目的

探究锌指E-盒结合同源盒1 （ZEB1）是否通过调控Wnt/β-catenin 信号通路促进前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

方法

向前列腺癌细胞PC-3、LNCaP 中转染siZEB1和Wnt3a 过表达质粒，依次分为对照，siZEB1 组和siZEB1+OE-Wnt3a 组。实时荧光定量聚合酶链式反应 （RT-qPCR）检测人正常前列腺上皮细胞RWPE1 和前列腺癌细胞PC-3、LNCaP 中ZEB1、Wnt3a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、E-cadherin 及N-cadherin mRNA 表达量；Western blot 检测前列腺癌细胞PC-3、LNCaP 中Wnt3a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、E-cadherin 及N-cadherin 蛋白的含量；CCK-8 实验以及平板克隆实验检测不同分组处理后的前列腺癌细胞增殖变化；划痕实验、侵袭测定 （Transwell） 实验检测不同分组处理后前列腺癌细胞的侵袭与迁移。两组间比较采用独立样本t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。

结果

与RWPE1细胞相比，前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中ZEB1 mRNA表达 （1.99 ±0.11、1.96 ± 0.13 比1.00 ± 0.05）上调 （P 均＜ 0.05）。转染siZEB1 后，与对照比较，siZEB1 组PC-3、LNCaP 细胞活性降低，克隆细胞数目[PC-3 细胞：（21.33 ± 2.05）比 （48.67 ± 3.68）个，LNCaP 细胞：（21.67 ± 2.87）比（47.33 ± 2.05）个］减少，迁移率[（30.67 ± 2.49）%比（48.33 ±2.49）%，（28.33 ± 3.40）%比 （43.00 ± 2.94）%］、侵袭数目[（43.00 ± 3.56）比 （64.00 ± 3.74）个，（42.67 ± 4.50）比 （61.33 ± 2.62）个］降低，凋亡率[（9.63 ± 0.66）% 比（1.25 ± 0.34）%，（9.34 ±0.72）% 比 （1.54 ± 0.42）%］上升 （P 均 ＜ 0.001）。转染siZEB1 后，与对照比较，siZEB1 组PC-3、LNCaP 细胞中Wnt3a、c-Myc、Cyclin D1、N-cadherin 蛋白表达和mRNA 表达、β-catenin蛋白表达下降， E-cadherin 蛋白表达和mRNA 表达上升；同时转染siZEB1 和OE-Wnt3a 后，与siZEB1 组比较，siZEB1+OE-Wnt3a 组Wnt3a、c-Myc、Cyclin D1、E-cadherin、N-cadherin 蛋白表达和mRNA 表达以及β-catenin 蛋白表达部分恢复 （P 均 ＜ 0.05）。同时转染siZEB1 和OE-Wnt3a 后，与siZEB1 组比较，siZEB1+OE-Wnt3a 组中PC-3、LNCaP 细胞活性、克隆细胞数目[PC-3 细胞：（35.67 ± 2.05）比 （18.33 ± 2.87）个，LNCaP 细胞：（31.33 ± 2.52）比 （15.00 ±3.61） 个］、迁移率[（50.67 ± 3.30）%比（43.67 ± 3.68）%，（53.67 ± 3.21）%比 （41.33 ± 5.50）%］、侵袭数目[（35.67 ± 1.24）比 （24.00 ± 2.45）个，（34.33 ± 4.04）比 （22.00 ± 3.00）个］上升，凋亡率[（6.74 ± 0.73）%比（9.75 ± 1.08）%，（8.30 ± 0.47）%比 （11.50 ± 0.56）%］降低 （P 均 ＜ 0.05）。

结论

ZEB1 通过调控Wnt/β-catenin 信号通路，在前列腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡中发挥重要作用。敲低ZEB1 可抑制前列腺癌细胞的恶性表型，而Wnt3a 的过表达能够部分逆转这种抑制作用。

目的

探讨人非小细胞肺癌细胞 （A549）和人正常肺上皮细胞（BEAS-2B）中双氢青蒿素 （DHA）抗甲型流感病毒 （H1N1）感染的作用机制。

方法

用不同浓度的DHA 分别作用于A549 和BEAS-2B 细胞24 h，计算DHA 在2 种细胞中的CC₅₀ 值。用H1N1 感染A549细胞3 h 后，给予不同浓度的DHA （0.1、1 和10 μmol/L）处理24 h，用CCK-8 法检测细胞活性。采用空斑实验检测DHA 抑制H1N1 复制作用。用代谢组学分析H1N1 感染后，DHA 引起的差异代谢物，并对差异代谢物进行KEGG 通路富集图等分析。用试剂盒检测细胞内还原型谷胱甘肽 （GSH）和氧化型谷胱甘肽 （GSSG）含量、细胞内活性氧 （ROS）和线粒体功能。Western blot检测RIG1、MAVS、p-TBK1 和p-IRF3 蛋白表达，实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法和酶联免疫吸附试验 （ELISA）分别检测IFN-α 和IFN-β mRNA 表达和分泌情况。两组间比较采用独立样本t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用Tukey 多重检验。

结果

DHA在A549 和BEAS-2B 细胞中的CC₅₀ 值分别为18.26 μmol/L 和28.61 μmol/L，且DHA 浓度为1 μmol/ L 时可以提高细胞活性并减少空斑形成。此外，DHA 通过调节谷胱甘肽代谢，抑制流感病毒感染引起的谷氨酸、甘氨酸和鸟氨酸等物质代谢，同时抑制GSH 耗竭、GSSG 和ROS 形成，并减轻线粒体损伤。DHA 作用提高RIG1 和MAVS 蛋白表达，促进MAVS 向线粒体聚集并激活下游TBK1 及IRF3 蛋白磷酸化，上调IFN-α 和IFN-β mRNA 表达水平，并促进其蛋白分泌。

结论

DHA 通过调节细胞内谷胱甘肽稳态、减少ROS 形成、减轻线粒体损伤并增强天然免疫应答发挥抗流感病毒作用。

目的

探讨阿托伐他汀对高脂饮食诱导的新西兰兔代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MAFLD）中巨噬细胞极化的作用及其相关机制。

方法

从GEO 数据库下载健康人群和MAFLD 患者的单细胞数据集。将15 只雄性新西兰兔分为正常组 （NCG）、高脂饮食组 （MCG）、高脂饮食+阿托伐他汀组 （PCG）。正常组给予基础饲料，其余各组给予高脂饲料。阿托伐他汀剂量为4 mg/ （kg·d）。8 周后，油红O 染色检测各组肝脏脂肪沉积的差异；Western blot 检测肝组织中Toll 样受体4/核因子κB （TLR4/NF-κB）的蛋白表达水平；流式细胞仪检测新西兰兔外周血中巨噬细胞亚型的比例。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用 Bonferroni法进行校正。

结果

单细胞数据分析结果提示TLR4 在MAFLD 患者的巨噬细胞各亚型中均有表达，且与M2 型巨噬细胞极化相关。与NCG 组比较，MCG 组新西兰兔在高脂饮食喂养8周后，油红O 染色检测发现肝脏脂肪沉积增多；TLR4 蛋白的表达水平 （0.68 ± 0.08）比（0.37 ±0.06）、NF-κB 蛋白的表达水平 （1.81 ± 0.14）比（1.27 ± 0.13） 升高，差异具有统计学意义 （P 均 ＜0.001）。阿托伐他汀治疗后，PCG 组新西兰兔肝脏脂肪沉积减少；TLR4 蛋白的表达水平 （0.58 ±0.08）比 （0.68 ± 0.08）、NF-κB 蛋白的表达水平 （1.60 ± 0.14）比 （1.80 ± 0.14）降低；外周血中M2 巨噬细胞比例[（2.22 ± 0.16）%比 （0.42 ± 0.05）%］升高，差异具有统计学意义 （P 均 ＜0.001）。

结论

外周血巨噬细胞亚型与MAFLD 病情相关。阿托伐他汀可以减少高脂饮食诱导的新西兰兔肝脏脂肪沉积，调控外周血M1/M2 巨噬细胞极化和肝脏内TLR4/NF-κB 信号通路表达，参与肝脏炎症损伤的修复。

目的

探讨染色体结构维持蛋白4 （SMC4）对低氧性人源肺动脉平滑肌（hPASMC）焦亡的影响及调控机制。

方法

以hPASMCs 为实验对象，将细胞随机分为常氧组、低氧组、低氧+NC 组、低氧+si-SMC4 组，除常氧组细胞在37℃、5%CO₂ 条件下培养外，低氧组及低氧+si-SMC4 组均在3%O₂，5%CO₂ 限制条件下培养24 h 建立低氧模型。使用Western blot 检测SMC4、以及焦亡相关蛋白，如白介素1β、GSDMD、GSDMD-N、NOD 样受体蛋白3（NLRP3）的表达水平；利用乳酸脱氢酶 （LDH）释放实验检测细胞培养液中分泌的LDH 释放量；利用细胞免疫荧光DAPI/PI 双染检测焦亡细胞比例。大鼠分为常氧组和10%O₂ 浓度低氧组，用血压监测及HE 染色判断动物模型是否成功，组织免疫荧光用于检测SMC4 组织定位，Western blot 检测各组织器官SMC4 的差异表达，两组间比较采用独立样本t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q 检验。

结果

与常氧组相比，低氧组大鼠肺组织SMC4 蛋白表达量升高 （0.86 ± 0.06 比0.75 ± 0.05，P ＜ 0.05），SMC4 定位在肺血管平滑肌层；与常氧组比较，低氧组肺动脉[（30.33 ± 3.49）比 （13.52 ± 2.34）μm］增厚、NEMO （0.77 ± 0.14比0.31 ± 0.09）、细胞焦亡相关蛋白NLRP3 （1.04 ± 0.15 比0.54 ± 0.22）、GSDMD （1.34 ± 0.32 比0.86 ± 0.34）、GSDMD-N （0.90 ± 0.11 比0.45 ± 0.02）、IL-1β （3.15 ± 0.56 比0.53 ± 0.06）表达、LDH 释放量百分比 （71.69 ± 10.36 比19.94 ± 3.54）、PI 阳性细胞 （4.81 ± 0.64 比2.18 ± 0.31）均升高 （P ＜ 0.05）。低氧+si-SMC4 组可以逆转上述影响。

结论

SMC4 在低氧性肺动脉高压中上调，激活细胞焦亡相关蛋白表达，增加hPASMCs LDH 释放及PI 阳性细胞比例，敲低SMC4 后，上述改变得到逆转可能与NEMO 调控相关。

【视频简介】 干细胞作为再生医学的核心资源，其质量与稳定性直接决定临床疗效与安全性。本报告从干细胞分类、国内应用现状、质控体系及稳定性研究四方面展开，系统阐述研究设计要点：（1）干细胞分类与国内应用；（2）质量控制核心要点；（3）稳定性研究设计；（4）法规与标准。

干细胞技术的突破依赖严谨的质量控制与稳定性研究。通过标准化流程、创新检测技术及国际化法规衔接，我国干细胞产业将加速迈向临床转化与产业化，引领未来医学革新。