探索长链非编码RNA （LncRNA）CRNDE通过微小RNA-181a-5p （miR-181a-5p）/转录因子性别决定区Y-box 6 （SOX6）轴对脂多糖（LPS）诱导人肺泡上皮细胞炎症反应和细胞凋亡的影响。

将所有质粒和寡核苷酸分别转染A549细胞，并进行LPS处理，并以未经处理的A549细胞为对照。qRT-PCR检测细胞中CRNDE、miR-181a-5p以及SOX6 mRNA的表达水平；流式细胞仪、ELISA法检测细胞凋亡及肿瘤坏死因子-α （TNF-α）、炎症因子白细胞介素-1β （IL-β）和IL-6水平；双荧光素酶实验分别验证CRNDE和miR-181a-5p以及miR-181a-5p与SOX6的靶向关系；Western blot检测磷酸化（p）-核因子κB （NF-κB） p65/NF-κB p65、SOX6、活化的半胱氨酸天冬氨酸酶3 （cleaved caspase-3）的表达水平。两组间比较采用独立样本t检验；各组数据均满足正态分布，当方差齐时采用单因素方差分析，进一步两组间比较采用SNK-q检验，方差不齐时采用Games-Howell法检验。

与对照比较，LPS的细胞凋亡率[（41.11 ± 4.11）%比（6.11 ± 0.61）%]、TNF-α [（353.21 ± 35.31）比（200.15 ± 20.02）pg/mg]、IL-1β [（286.91 ± 28.71）比（35.76 ± 3.58）pg/mg]、IL-6[（642.31 ± 64.23）比（32.64 ± 3.26）pg/mg]、CRNDE （0.66 ± 0.06比0.33 ± 0.03）、SOX6 （0.68 ± 0.06比0.28 ± 0.03）、cleaved caspase-3 （0.76 ± 0.07比0.24 ± 0.02）、p-NF-κB p65/NF-κB p65 （0.85 ± 0.08比0.26 ± 0.03）升高，miR-181a-5p表达（0.32 ± 0.03比0.64 ± 0.06）降低（P < 0.05）；与si-NC组相比，干扰CRNDE降低LPS诱导细胞的凋亡率[（15.58 ± 1.55）%比（41.09 ± 4.09）%]、TNF-α[（200.15 ± 20.02）比（356.51 ± 35.65）pg/mg]、IL-1β[（99.32 ± 9.94）比（288.88 ± 28.89 ） pg/mg]、IL-6[（211.34 ± 21.14）比（639.89 ± 63.99）pg/mg]、CRNDE（0.35 ± 0.03比0.65 ± 0.06）、SOX6 （0.39 ± 0.04比0.64 ± 0.07）的表达（P < 0.05），干扰SOX6降低LPS诱导细胞的凋亡率[（15.34 ± 1.53）%比（41.09 ± 4.09）%]、TNF-α[（192.37 ± 19.24）比（356.51 ± 35.65）pg/mg]、IL-1β [（100.02 ± 10.01）比（288.88 ± 28.89）pg/mg]、IL-6[（204.86 ± 20.49）比（639.89 ± 63.99）pg/mg]、SOX6 （0.36 ± 0.03比0.64 ± 0.07）的表达（P < 0.05）；与miR-NC相比，过表达miR-181a-5p降低LPS诱导细胞的凋亡率[（15.34 ± 1.53）%比（40.89 ± 4.09）%]、TNF-α [（189.45 ± 19.01）比（356.68 ± 35.67）pg/mg]、IL-1β[（95.37 ± 9.54）比（288.67 ± 28.87） pg/mg]、IL-6[（209.84 ± 20.98）比（637.93 ± 63.81）pg/mg]水平，miR-181a-5p （0.55 ± 0.05比0.35 ± 0.03）表达增加（P < 0.05）。抑制miR-181a-5p表达可逆转干扰CRNDE对LPS诱导A549细胞的保护作用；上调SOX6可逆转干扰CRNDE、过表达miR-181a-5p对LPS诱导A549细胞的保护作用。

干扰CRNDE可以抑制LPS诱导A549细胞的炎症反应和细胞凋亡，可能与调控miR-181a-5p/SOX6轴有关。

探讨人大细胞肺癌NCI-H460细胞对类泛素化抑制剂MLN4924潜在新型耐药机制。

利用MLN4924处理NCI-H460细胞，筛选和建立耐药细胞株。对普通NCI-H460对照细胞、MLN4924处理8 h加药细胞株、48 h加药细胞株和建立成功的耐药株进行高通量转录组测序。根据测序结果筛选差异表达基因，并进行通路富集分析。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用Dunnett-t检验。

共构建3个NCI-H460耐药细胞株。转录组测序分析显示，与对照比较，MLN4924处理8 h加药株、处理48 h加药株、三株耐药株分别筛选出5 303、4 186、3 388、3 675和3 267个差异表达基因，包括ABCA9、ABCA13、CYR61和CYP39A1等基因。RT-qRCR实验进一步验证了在瞬时加药组和耐药株中ABCA9和CYR61基因高表达。GO富集分析结果显示，差异表达基因与细胞周期、细胞凋亡、细胞间信号转导和细胞黏附等细胞生物过程高度相关，还与细胞核和细胞膜等细胞组分密切相关。KEGG通路富集分析结果显示，耐药细胞中差异表达基因集中在MAPK信号通路、PI3K/Akt信号通路和cAMP信号通路等。

在人大细胞肺癌NCI-H460细胞中，ABCA9、CYR61、ABCC8和CYP4F12等基因的表达变化可能会提高其对MLN4924的耐药能力。这种耐药能力可能与MAPK信号通路、PI3K/Akt信号通路和cAMP信号通路有关。

探讨和厚朴酚调节核转录相关因子2 （Nrf2）/抗氧化反应元件（ARE）通路对胃癌细胞顺铂耐药的影响。

体外培养人胃癌顺铂耐药细胞SGC7901/DDP，采用5 μg/mL、15 μg/mL和厚朴酚及15 μg/mL和厚朴酚联合1 mmol/L Nrf2/ARE通路激活剂富马酸二甲酯（DMF）进行干预；MTT法检测细胞增殖；划痕实验、Transwell小室检测细胞迁移、侵袭；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot检测细胞Nrf2、血红素加氧酶1 （HO-1）、P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白1 （MRP1）、增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶2 （MMP2）、基质金属蛋白酶9 （MMP9）、半胱氨酸蛋白酶3 （caspase-3）和活化的caspase-3 （cleaved caspase-3）的表达；构建SGC7901/DDP移植瘤裸鼠模型，随机分为对照组、低剂量和厚朴酚组、高剂量和厚朴酚组、Nrf2/ARE通路激活剂组，分组处理后检测其肿瘤体积与重量。单因素方差分析和Tukey检验用于多组间的比较。

与对照组比较，低、高剂量和厚朴酚组OD₄₉₀值、划痕愈合率[（31.24 ± 2.23）%、（25.36 ± 2.06）%比（48.01 ± 2.13）%]、侵袭率[（38.61 ± 2.24）%、（29.57 ± 2.41）%比（52.36 ± 2.13）%]、肿瘤体积与质量、HO-1、P-gp、MRP1、PCNA、MMP2、MMP9、核Nrf2蛋白表达均降低（P均< 0.05），凋亡率[（27.24 ± 2.24）%、（38.56 ± 2.31）%比（17.31 ± 3.12）%]、caspase-3和cleaved caspase-3蛋白表达升高（P < 0.05）；与高剂量和厚朴酚组比较，Nrf2/ARE通路激活剂组的OD₄₉₀值、划痕愈合率[（37.71 ± 2.17）%比（25.36 ± 2.06）%]、侵袭率[（43.53 ± 2.37）%比（29.57 ± 2.41）%]、肿瘤体积与质量、HO-1、P-gp、MRP1、PCNA、MMP2、MMP9和核Nrf2蛋白表达均升高（P < 0.05），凋亡率[（21.48 ± 2.16）%比（38.56 ± 2.31）%]、caspase-3和cleaved caspase-3蛋白表达降低（P均< 0.05）。

和厚朴酚可能通过调控Nrf2/ARE信号通路进而影响胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP的顺铂化疗敏感性。

探讨circSERPINE2对滋养层细胞HTR8/SVneo增殖、迁移和侵袭的影响和可能机制。

收集37例子痫前期患者胎盘组织和37例正常妊娠孕妇胎盘组织。体外培养滋养层细胞HTR8/Svneo，转染circSERPINE2小干扰RNA （si-circSERPINE2）或miR-34a-5p模拟物、或共转染circSERPINE2小干扰RNA与miR-34a-5p抑制剂至HTR8/Svneo细胞。qRT-PCR法检测circSERPINE2和miR-34a-5p表达；CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖；划痕实验、Transwell和Western blot法分别检测细胞迁移、侵袭及细胞中E-cadherin和N-cadherin表达。双荧光素酶报告基因实验证实circSERPINE2和miR-34a-5p的靶向关系。两组间比较采用配对样本t检验或独立样本t检验；多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。

与正常胎盘组织比较，子痫前期患者胎盘组织中circSERPINE2的表达（0.37 ± 0.04比1.00 ± 0.11）降低，miR-34a-5p的表达（3.50 ± 0.28比1.00 ± 0.08）升高，差异有统计学意义（P均< 0.05）。与si-NC比较，si-circSERPINE2的HTR8/Svneo细胞中circSERPINE2表达水平（0.31 ± 0.03比1.01 ± 0.06）、细胞活力、克隆形成数、侵袭数、划痕愈合率及N-cadherin表达下降，E-cadherin表达增高（P均< 0.05）；与miR-NC比较，转染miR-34a-5p的HTR8/Svneo细胞活力、克隆形成数、侵袭数、划痕愈合率及N-cadherin表达下降，miR-34a-5p （3.48 ± 0.32比1.00 ± 0.00）、E-cadherin表达增高（P均< 0.05）。circSERPINE2靶向负调控miR-34a-5p。下调miR-34a-5p可逆转敲减circSERPINE2对HTR8/Svneo细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。

circSERPINE2在子痫前期患者胎盘组织中表达下调，敲减circSERPINE2可能通过靶向负调控miR-34a-5p表达抑制滋养层细胞增殖、迁移和侵袭。

应用单细胞RNA测序技术（scRNA-seq）探讨细胞通讯网络因子2 （CCN2，也称为CTGF）在特纳综合征（TS）胎儿颈部淋巴水囊瘤（CH）的潜在发生机制。

收集2020年1月至2020年12月于广州市妇女儿童医疗中心产前诊断中心就诊，孕11 ~ 13⁺⁶周经腹部超声检查诊断为CH而终止妊娠及相同孕周因社会因素终止妊娠病例，产前未行遗传学检测者，需同时取引产胎儿胎盘绒毛组织或骨骼肌，按照标准的操作流程进行遗传学检测。全部病例应用遗传学检测确定染色体异常类型后，CH病例中选择遗传学结果为45，X0的胎儿作为实验组，无CH病例中选择遗传学结果为46，XN的胎儿作为对照组。本研究共纳入6例样本，实验组3例，对照组3例。所有入组病例在终止妊娠后立即取颈后皮肤组织，一部分样本应用HE染色进行病理分析，一部分应用scRNA-seq分析颈后皮肤组织细胞类型并建立差异基因表达谱，并进一步应用RT-qPCR检测细胞中基因表达水平及Western blot检测相关蛋白表达情况以明确单细胞测序结果的可靠性。实验组与对照组采用独立样本t检验进行统计学分析。

病理结果提示实验组表现为淋巴管增生和扩张，淋巴结增多坏死，血管减少，间质纤维丝束增多、变长，并出现大量细胞浸润组织间隙。应用scRNA-seq分析CH病例，共捕获细胞54 488个，26个聚类，其中成纤维细胞占23.1%。同时发现基质细胞蛋白CCN2高表达。进一步定位分析显示实验组中CCN2主要高表达在成纤维细胞、内皮细胞、组织干细胞和间充质干细胞。同时Western blot验证CCN2蛋白在实验组中高表达（2.47 ± 0.49比1.00 ± 0.08，P < 0.05）。

病理结果表明淋巴管增生扩张和淋巴结增多坏死等淋巴管发育异常是TS胎儿CH的病理生理学基础。scRNA-seq结果表明基质细胞蛋白CCN2异常高表达可能导致TS胎儿CH。

已有研究表明衰老和衰弱影响人体免疫细胞转录组异质性和变异性。本研究着重探寻不同衰弱状态下高龄老人外周血转录组特征差异。

下载基因表达数据库（GEO）中的GSE157007数据集，分析衰弱与非衰弱高龄老人外周血单个核细胞分布、特征，对差异表达基因（DEGs）进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，并采用CellChat包分析细胞间的相互作用和通讯情况。

与非衰弱组相比，衰弱组中T细胞、单核细胞总比例降低，自然杀伤（NK）细胞比例升高，B细胞比例相当。组间各细胞亚群DEGs存在差异，通路富集分析发现DEGs主要富集于抗原呈递、肿瘤坏死因子信号通路和趋化因子信号等通路。进一步细胞通讯分析显示衰弱组细胞间相互作用数目和强度均少于非衰弱组，组间细胞间相互作用的模式和信号通路不同。

不同衰弱状态的高龄老人外周血单细胞转录组特征存在差异。

探讨LINC00466对子宫内膜癌RL95-2细胞生物学行为的影响及其作用机制。

收集43例子宫内膜癌患者癌组织和癌旁组织，qRT-PCR法检测组织中LINC00466和miR-493-3p表达。体外培养RL95-2细胞，转染LINC00466小干扰RNA或miR-493-3p模拟物、或共转染LINC00466小干扰RNA与miR-493-3p抑制剂后，CCK-8法、Transwell实验分别检测细胞增殖抑制率、迁移和侵袭，qRT-PCR和Western blot分别检测细胞中巨噬细胞移动抑制因子（MIF） mRNA和蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验对LINC00466和miR-493-3p调控关系进行验证。两组间比较采用t检验。

子宫内膜癌组织中LINC00466的表达量较癌旁组织（2.66±0.34比0.95±0.21）升高，miR-493-3p的表达量较癌旁组织（0.42±0.10比0.98±0.15）降低，差异有统计学意义（P均< 0.001）。干扰LINC00466或过表达miR-493-3p增加RL95-2细胞增殖抑制率，减少细胞迁移数、侵袭数及细胞中MIF mRNA和蛋白表达（P < 0.001）。LINC00466靶向结合miR-493-3p，且干扰LINC00466的RL95-2细胞中miR-493-3p表达增加。敲减miR-493-3p逆转干扰LINC00466对RL95-2细胞增殖、迁移和侵袭及MIF表达的影响。

LINC00466在子宫内膜癌组织中表达上调，干扰LINC00466可能通过靶向上调miR-493-3p和阻碍MIF表达来抑制子宫内膜癌RL95-2细胞增殖、迁移和侵袭。

探讨miR-301a-3p对人卵巢颗粒KGN细胞增殖和凋亡的机制研究。

采用RT-qPCR检测38例多囊卵巢综合征（PCOS）卵巢皮质组织和外周血、人卵巢颗粒KGN细胞内miR-301a-3p表达水平；将KGN细胞分为空白对照、anti-miR-NC、anti-miR-301a-3p，RT-qPCR检测miR-301a-3p表达水平；MTT、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡；平板实验检测克隆形成能力；Western blot检测PCNA、Bax、Bcl-2及MAPK信号通路相关蛋白表达。加入MAPK信号通路抑制剂SB203580，并采用以上方法检测其增殖和凋亡的影响。两组间比较采用独立样本t检验，方差不齐性采用t'检验；多组间比较采用单因素方差分析，两两比较组间方差齐时采用LSD-t检验，方差不齐时采用Tamhane's T2检验。

与对照组比较，PCOS组的组织内和外周血内miR-301a-3p表达（2.65 ± 0.44比1.08 ± 0.22，2.54 ± 0.47比1.05 ± 0.22）升高（P均< 0.05）；与人正常卵巢上皮IOSE80a细胞比较，人卵巢颗粒KGN细胞内miR-301a-3p表达（2.38 ± 0.38比0.99 ± 0.10）升高，差异有统计学意义；下调miR-301a-3p可降低细胞活性、克隆细胞数，增加细胞凋亡率、Bax蛋白表达，降低PCNA、Bcl-2、p-p38 MAPK、p-ERK1/2蛋白表达水平，差异有统计学意义（P均< 0.05）。与anti-miR-301a-3p比较，anti-miR-301a-3p+ SB203580克隆细胞数、细胞活性降低，PCNA、Bcl-2蛋白表达水平降低，细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平升高，差异有统计学意义（P均< 0.05）。

在人卵巢颗粒细胞内miR-301a-3p高表达，下调miR-301a-3p可抑制人卵巢颗粒KGN细胞增殖和诱导凋亡，其作用机制可能与抑制MAPK信号通路有关。

探讨miR-15a-5p靶向乙酰肝素酶2 （HPSE2）对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。

以人宫颈癌细胞系（Hela和SIHA）为研究对象，将miR-15a-5p mimic，miR-15a-5p inhibitor和HPSE2质粒转染进入细胞。分别采用CCK-8检测细胞活力，划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力，Western blot检测HPSE2表达，RT-qPCR检测细胞中miR-15a-5p和HPSE2 mRNA水平。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。

与人正常宫颈上皮细胞（HcerEpic）比较，宫颈癌细胞Hela、HeRC32和SIHA中miR-15a-5p水平[（3.11 ± 0.32）、（1.51 ± 0.07）、（1.64 ± 0.09）比（1.00 ± 0.05）]升高，而HPSE2 mRNA水平[（0.29 ± 0.04）、（0.45 ± 0.09）、（0.45 ± 0.10）比（1.00 ± 0.05）]降低（P均< 0.05）；与对照比较，转染miR-15a-5p inhibitor抑制宫颈癌细胞Hela和SIHA增殖[72 h：（0.85 ± 0.08）比（1.10 ± 0.12）、（0.76 ± 0.12）比（1.04 ± 0.11）]、迁移[（12.67 ± 2.52）%比（23.00 ± 3.00）%、（14.33 ± 2.52）%比（24.67 ± 2.52）%]和侵袭能力[（59.33 ± 11.24）比（127.00 ± 12.49）、（65.67 ± 14.05）比（136.00 ± 15.52）个]；与对照比较，miR-15a-5p mimic可以进一步抑制宫颈癌细胞Hela和SIHA中HPSE2蛋白表达[（0.61 ± 0.02）比（1.00 ± 0.03）、（0.34 ± 0.05）比（1.00 ± 0.05）]；与miR-15a-5p mimic相比，过表达HPSE2可以增加宫颈癌细胞Hela和SIHA中HPSE2蛋白水平[（2.14 ± 0.13）比（1.00 ± 0.12）、（1.71 ± 0.02）比（1.00 ± 0.03）]；过表达HPSE2可以逆转miR-15a-5p mimic的作用，抑制宫颈癌细胞Hela和SIHA增殖[72 h：（0.83 ± 0.10）比（1.44 ± 0.14）、（0.93 ± 0.06）比（1.25 ± 0.10）]、迁移[（34.00 ± 5.57）%比（43.67 ± 10.41）%、（33.00 ± 3.61）%比（41.00 ± 8.00）%]和侵袭能力[（158.00 ± 13.89）比（260.66 ± 15.26）、（150.67 ± 23.54）比（270.00 ± 12.77）个]。

miR-15a-5p通过调控HPSE2促进宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。

研究一种高活性间充质干细胞（HA-MSCs）对衰老猕猴卵巢结构与功能的干预作用。

分别使用TeSR-E8培养基和含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基从青年猕猴骨髓中分离、扩增得到猕猴HA-MSCs与骨髓间充质干细胞（BMSCs），流式细胞仪检测细胞表面标志物，并进行成脂、成骨和成软骨诱导分化能力鉴定。然后将这2种细胞按1×10⁷个细胞/kg的剂量，1日1次，连续3 d静脉输注给卵巢衰老猕猴，于治疗前1天、治疗后1、2、3、5个月检测外周血抗苗勒氏管激素（AMH）水平，治疗后第5个月将猕猴安乐死，HE染色观察卵巢的组织病理结构，Masson染色评价卵巢纤维化程度变化，免疫组织化学染色检测卵巢p16、p21衰老相关蛋白的表达水平。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用Tukey方法。

HA-MSCs呈短小梭形，核质比高，形态均一。BMSCs体积较大，呈典型的成纤维细胞形态，有少量杂细胞。HA-MSCs的成脂、成骨和成软骨分化能力均强于BMSCs。与老年模型组比较，HA-MSCs治疗组在治疗后2个月内AMH水平[（1.85 ± 0.21）比（0.29 ± 0.15）ng/mL]增加，该组卵巢组织可见各级卵泡，纤维化程度降低（P均< 0.001）。与老年模型组比较，BMSCs治疗组在治疗后1个月时AMH水平[（1.26 ± 0.28）比（0.36 ± 0.16）ng/mL]增加，与HA-MSCs治疗组比较，BMSCs治疗组在治疗后2个月时AMH水平[（1.85 ± 0.21）比（0.60 ± 0.20）ng/mL]降低，该组可见少量未成熟卵泡及原始卵泡，纤维化程度降低（P均< 0.001）。老年模型组AMH水平最低，卵巢组织偶见闭锁卵泡，广泛纤维化。卵巢p16、p21蛋白表达水平在老年模型组最高，HA-MSCs治疗组最低，BMSCs治疗组次之。

HA-MSCs提高衰老卵巢的储备能力，减轻卵巢纤维化，减少卵巢衰老相关蛋白的表达，重启卵泡生成功能，在治疗卵巢衰老上相较BMSCs效果更佳。