脐血与老人外周血中TIMP2蛋白检测的影响因素及意义

doi:10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2019.04.004

目的

探讨不同血浆处理方式对脐血和老人外周血血浆中TIMP2蛋白检测的影响，建立人血浆中TIMP2蛋白检测方法的同时为联合干细胞延缓衰老提供理论基础。

方法

采集了15份脐带血和15份老人外周血，利用不同的离心力、不同的储存温度和不同的检测试剂盒对血浆中TIMP2蛋白最终检测含量的影响。多组均数差异比较采用单因素方差分析，两组比较采用独立样本t检验。

结果

1?000×g、1?500×g和2?000×g离心力组组间TIMP2蛋白含量差异无统计学意义（P?> 0.05）。4 ℃、-20?℃、-80?℃保存组，保存一周或者两周TIMP2蛋白含量差异均无统计学意义（P?> 0.05）。利用R&D Systems、Abnova和Abcam检测试剂盒均不对全血中TIMP2蛋白最终检测量产生显著影响（P?>?0.05）。脐带血中的TIMP2蛋白含量（147.00±15.92）?pg/ml高于老人外周血中TIMP2蛋白含量（79.56±10.80）?pg/?ml，差异具有统计学意义（P?< 0.01）。

结论

不同离心力、血浆储存温度及检测试剂盒间均不影响脐血和老人外周血中TIMP2蛋白最终的检测含量，且脐血血浆中TIMP2蛋白含量高于老人外周血。显示TIMP2蛋白可能与衰老存在直接的相关性，具有与干细胞联合治疗并延缓衰老的潜在价值。

关键词: 脐血, 老年人, 外周血, TIMP2蛋白, 干细胞, 抗衰老

Objective

To explore the effects of different treatments on the detection of TIMP2 protein in umbilical cord blood or peripheral blood of elder. The establishment of a method for detecting the stability of TIMP2 protein in human plasma provided a theoretical basis for the possibility of combining stem cells to anti-aging.

Methods

15 umbilical cord blood samples and 15 peripheral blood samples of elder were collected. The effects of final detection of TIMP2 protein in plasma were investigated, which was used different centrifugal forces, different storage temperatures and different test kits. The difference between the two groups were compared by one-way ANOVA and independent sample t-test.

Results

There was no significant difference in TIMP2 protein content among 1?000×g centrifugal force, 1?500×g centrifugal force and 2?000×g centrifugal force. There was no significant difference in TIMP2 protein content among 4℃, -20℃ and -80℃ storage temperature. The R&D Systems, Abnova and Abcam test kits did not significantly affect the final detection of TIMP2 protein in whole blood. Moreover, the contents of TIMP2 protein in umbilical cord blood (147.00±15.92) pg/ml were significantly higher than that in the peripheral blood of the elder (79.56±10.80, P?< 0.01) .

Conclusion

Different centrifugal forces, different storage temperatures and different test kits did not affect the final detection of TIMP2 in the cord blood and peripheral blood of the elder. Moreover, the contents of TIMP2 protein in the cord blood were significantly higher than that in the peripheral blood of the elder, which indicated that TIMP2 protein had a direct relationship of aging. It is of a potential value in anti-aging combined with the stem cells.

Key words: Umbilical cord blood, Aged, Peripheral blood, TIMP2 protein, Stem cell, Anti-aging

表1 不同离心力对TIMP2蛋白检测的影响（ ± s）

离心力	样本数	脐血（ng/ml）	老人外周血（ng/ml）
1?000×g	5	147.23±22.59	91.36±5.19
1?500×g	5	147.64±18.32	87.70±6.97
2?000×g	5	145.27±20.57	89.25±5.63
F值	?	0.002	1.321
P值	?	> 0.05	> 0.05

表1 不同离心力对TIMP2蛋白检测的影响（ ± s）

离心力	样本数	脐血（ng/ml）	老人外周血（ng/ml）
1?000×g	5	147.23±22.59	91.36±5.19
1?500×g	5	147.64±18.32	87.70±6.97
2?000×g	5	145.27±20.57	89.25±5.63
F值	?	0.002	1.321
P值	?	> 0.05	> 0.05

表2 不同温度保存血浆1周对TIMP2蛋白检测的影响（ ± s）

温度	样本数	脐血（ng/ml）	老人外周血（ng/ml）
4℃	5	148.40±18.50	70.65±11.38
-20℃	5	151.27±18.70	73.00±10.48
-80℃	5	150.00±16.82	72.42±11.59
F值	?	0.089	0.169
P值	?	> 0.05	> 0.05

表2 不同温度保存血浆1周对TIMP2蛋白检测的影响（ ± s）

温度	样本数	脐血（ng/ml）	老人外周血（ng/ml）
4℃	5	148.40±18.50	70.65±11.38
-20℃	5	151.27±18.70	73.00±10.48
-80℃	5	150.00±16.82	72.42±11.59
F值	?	0.089	0.169
P值	?	> 0.05	> 0.05

表3 不同温度保存血浆2周对TIMP2蛋白检测的影响（ ± s）

温度	样本数	脐血（ng/ml）	老人外周血（ng/ml）
4℃	5	145.35±22.25	66.99±10.58
-20℃	5	151.59±19.62	72.31±12.41
-80℃	5	149.15±17.90	71.22±13.12
F值	?	0.346	0.756
P值	?	> 0.05	> 0.05

表3 不同温度保存血浆2周对TIMP2蛋白检测的影响（ ± s）

温度	样本数	脐血（ng/ml）	老人外周血（ng/ml）
4℃	5	145.35±22.25	66.99±10.58
-20℃	5	151.59±19.62	72.31±12.41
-80℃	5	149.15±17.90	71.22±13.12
F值	?	0.346	0.756
P值	?	> 0.05	> 0.05

表4 不同ELISA试剂盒对TIMP蛋白检测的影响（ ± s）

试剂盒	样本数	脐血（ng/ml）	老人外周血（ng/ml）
R&D	5	144.73± 8.22	76.80± 8.98
Abnova	5	145.25±11.80	77.17±11.34
Abcom	5	142.95±16.01	76.76±11.58
F值	?	0.131	0.774
P值	?	> 0.05	> 0.05

表4 不同ELISA试剂盒对TIMP蛋白检测的影响（ ± s）

试剂盒	样本数	脐血（ng/ml）	老人外周血（ng/ml）
R&D	5	144.73± 8.22	76.80± 8.98
Abnova	5	145.25±11.80	77.17±11.34
Abcom	5	142.95±16.01	76.76±11.58
F值	?	0.131	0.774
P值	?	> 0.05	> 0.05

表5 脐血和老人外周血TIMP2蛋白含量比较（ ± s）

血液类型	样本数	TIMP2蛋白含量（ng/ml）
脐血	15	144.73±8.22
老人外周血	15	76.80±8.98
F值	?	174.042
P值	?	< 0.01

表5 脐血和老人外周血TIMP2蛋白含量比较（ ± s）

血液类型	样本数	TIMP2蛋白含量（ng/ml）
脐血	15	144.73±8.22
老人外周血	15	76.80±8.98
F值	?	174.042
P值	?	< 0.01

1	曲泽澎, 贾兆锋, 黄曦, 等. 间充质干细胞在器官移植中的应用研究进展[J]. 器官移植, 2018, 9(5):348-353.
2	刘淼, 叶俊儒. 间充质干细胞抗衰老的理论研究进展[J]. 四川解剖学杂志, 2017, 25(4):30-36.
3	王勤周, 王辉, 陈红艳. 干细胞技术在抗衰老中的应用[J]. 中国美容医学, 2018, 27(11):170-173.
4	孙爱励, 胡晓东, 吴待英, 等. 脐血与成人血成分,T淋巴细胞亚群及正常人骨髓集落形成的比较研究[J]. 白血病·淋巴瘤, 2001, 10(2):84-86.
5	彭新国, 安佳佳, 董艳, 等. 脐血与成人外周血中淋巴细胞分泌细胞因子能力的分析[J]. 中外医疗, 2016, 35(9):48-50.
6	Bai L, Shi G, Yang Y, et al. Anti-Aging effect of siraitia grosuenorii by enhancement of hematopoietic stem cell function[J]. Am J Chin Med, 2016, 44(4):803-815.
7	Baker AH, Edwards DR, Murphy G. Metalloproteinase inhibitors: biological actions and therapeutic opportunities[J]. J Cell Sci, 2002, 115(Pt 19):3719-3727.
8	Brew K, Dinakarpandian D, Nagase H. Tissue inhibitors of metalloproteinases: evolution, structure and function[J]. Biochim Biophys Acta, 2000, 1477(1/2):267-283.
9	Wang W, Zhang YF, Liu MX, et al. TIMP2 is a poor prognostic factor and predicts metastatic biological behavior in gastric cancer[J]. Sci Rep, 2018, 8(1):9629-9640.
10	Adler C, Heller T, Schregel F, et al. TIMP-2/IGFBP7 predicts acute kidney injury in out-of-hospital cardiac arrest survivors[J]. Crit Care, 2018, 22(1):126-135.
11	Castellano JM, Mosher KI, Abbey RJ, et al. Human umbilical cord plasma proteins revitalize hippocampal function in aged mice[J]. Nature, 2017, 544(7651):488-492.
12	Vijg J, Kennedy BK. The essence of aging[J]. Gerontology, 2016, 62(4):381-385.
13	Cornelissen G, Otsuka K. Chronobiology of aging: a Mini-Review[J]. Gerontology, 2017, 63(2):118-128.
14	López-Otín C, Blasco MA, Partridge L, et al. The hallmarks of aging[J]. Cell, 2013, 153(6):1194-1217.
15	Barbosa MC, Grosso RA, Fader CM. Hallmarks of aging: An autophagic perspective[J]. Frontiers in endocrinology, 2018, 9:790.
16	Niedernhofer LJ, Kirkland JL, Ladiges W. Molecular pathology endpoints useful for aging studies[J]. Ageing Res Rev, 2017, 35:241-249.
17	Andrews-Hanna JR, Snyder AZ, Vincent JL, et al. Disruption of large-scale brain systems in advanced aging[J]. Neuron, 2007, 56(5):924-935.
18	Zhang SC, Dong ZQ, Peng ZS, et al. Anti-Aging effect of Adipose-Derived stem cells in a mouse model of skin aging induced by D-Galactose[J]. PLoS One, 2014, 9(5):e97573-e97580.
19	Li W, Li N, Sui B, et al. Anti-aging effect of fullerenol on skin aging through derived stem cells in a mouse model[J]. Exp Ther Med, 2017, 14(5):5045-5050.

[1]	宋勤琴, 李双汝, 李林, 杜鹃, 刘继松. 间充质干细胞源性外泌体在改善病理性瘢痕中作用的研究进展[J/OL]. 中华损伤与修复杂志(电子版), 2024, 19(06): 550-553.
[2]	刘昌玲, 张金丽, 张志, 李孝建, 汤文彬, 胡逸萍, 陈宾, 谢晓娜. 负载人脂肪干细胞外泌体的甲基丙烯酰化明胶水凝胶对人皮肤成纤维细胞增殖和迁移的影响[J/OL]. 中华损伤与修复杂志(电子版), 2024, 19(06): 517-525.
[3]	雷子威, 凌萍, 沈纵, 魏晨如, 朱邦晖, 伍国胜, 孙瑜. 类器官肺损伤疾病模型构建及应用的研究进展[J/OL]. 中华损伤与修复杂志(电子版), 2024, 19(06): 531-535.
[4]	宋俊锋, 张珍珍. 单侧初发性腹股沟斜疝老年患者经腹腹膜前疝修补术中残余疝囊腹直肌下缘固定效果评估[J/OL]. 中华疝和腹壁外科杂志(电子版), 2024, 18(06): 670-674.
[5]	张晋伟, 董永红, 王家璇. 基于GBD2021 数据库对中国与全球老年人疝疾病负担和健康不平等的分析比较[J/OL]. 中华疝和腹壁外科杂志(电子版), 2024, 18(06): 708-716.
[6]	邵世锋, 肖钦, 沈方龙, 张迅, 郝志鹏, 伍正彬, 谢晓娟, 王耀丽. 老年胸主动脉钝性伤的重症救治分析[J/OL]. 中华肺部疾病杂志(电子版), 2024, 17(05): 762-767.
[7]	赵小欢, 尚志英, 段文超, 张晓燕, 孙东强. 无创通气治疗COPD 并发呼吸衰竭不同预后患者外周血MicroRNA及炎性因子水平分析[J/OL]. 中华肺部疾病杂志(电子版), 2024, 17(05): 777-780.
[8]	傅红兴, 王植楷, 谢贵林, 蔡娟娟, 杨威, 严盛. 间充质干细胞促进胰岛移植效果的研究进展[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(06): 351-360.
[9]	王大伟, 陆雅斐, 皇甫少华, 陈玉婷, 陈澳, 江滨. 间充质干细胞通过调控免疫机制促进创面愈合的研究进展[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(06): 361-366.
[10]	刘文竹, 唐窈, 刘付臣. 诱导多潜能干细胞在神经肌肉疾病研究中的应用进展[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(06): 367-373.
[11]	袁园园, 岳乐淇, 张华兴, 武艳, 李全海. 间充质干细胞在呼吸系统疾病模型中肺组织分布及治疗机制的研究进展[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(06): 374-381.
[12]	蔡艺丹, 方坚, 张志强, 陈莉, 张世安, 夏磊, 阮梅, 李东良. 经颈静脉肝内门体分流术对肝硬化门脉高压患者肠道菌群及肝功能的影响[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(05): 285-293.
[13]	王俊楠, 刘晔, 李若涵, 叶青松. 间充质干细胞调控肠脑轴治疗神经系统疾病的潜力[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(05): 313-319.
[14]	王向前, 李清峰, 陈磊, 丘文丹, 姚志成, 李熠, 吴荣焕. 姜黄素抑制肝细胞癌索拉非尼耐药作用及其调控机制[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(05): 729-735.
[15]	王贝贝, 崔振义, 王静, 王晗妍, 吕红芝, 李秀婷. 老年股骨粗隆间骨折患者术后贫血预测模型的构建与验证[J/OL]. 中华老年骨科与康复电子杂志, 2024, 10(06): 355-362.

阅读次数

全文

HTML			PDF

最新录用	在线预览	正式出版	最新录用	在线预览	正式出版
0	0	0	0	0	0

摘要

最新录用	在线预览	正式出版

0	0	73

来源	本网站	其他网站

次数	44	30
比例	59%	41%

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Detection of TIMP2 protein in plasma between the cord blood and peripheral blood of the elder

模态框（Modal）标题

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Detection of TIMP2 protein in plasma between the cord blood and peripheral blood of the elder