探讨柚皮苷（NG）对高糖环境下MC3T3-E1细胞活力的影响及可能的分子机制。

体外培养小鼠MC3T3-E1细胞，实验分5组：对照组（正常无血清培养基）、高糖组（含25 mmol/L葡萄糖）、0.1 μmol/L +高糖组（0.1 μmol/L NG + 25 mmol/L葡萄糖）、1 μmol/L +高糖组（1 μmol/L NG+25 mmol/L葡萄糖）、10 μmol/L +高糖组（10 μmol/L NG+25 mmol/L葡萄糖）。药物干预后，采用CCK-8法检测细胞活力；实时荧光定量PCR（qPCR）法检测细胞成骨特异性转录因子（Runx2）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、蛋白激酶（Akt1）mRNA的表达；蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞碱性磷酸酶（ALP）、Akt1、IGF-1蛋白的表达。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。

CCK8检测结果显示，与对照组比较，高糖组细胞OD值（12 h：0.90±0.01比0.80±0.01，24 h：1.00±0.05比0.84±0.01，48 h：1.09±0.03比0.90±0.01）均降低，差异有统计学意义（P < 0.01）；与高糖组比较，0.1 μmol/L+高糖组细胞OD值（24 h：0.84±0.01比0.93±0.05，48 h：0.90±0.01比0.99±0.01）、1 μmol/L +高糖组和10 μmol/L+高糖组OD值（12 h：0.80±0.01比0.92±0.01、1.01±0.32，24 h：0.84±0.01比1.01±0.04、1.16±0.03，48 h：0.90±0.01比1.12±0.02、1.20±0.02）均升高，差异有统计学意义（P < 0.05）。与对照组比较，高糖组细胞Runx2、IGF-1、Akt1的mRNA的表达水平（24 h：1.00比0.34±0.02、1.00比0.34±0.01、1.00比0.15±0.02）、（48 h：1.00比0.72±0.03、1.00比1.09±0.07、1.00比0.38±0.04）降低，差异有统计学意义（P < 0.01）。与高糖组比较，1 μmol/L +高糖组和10 μmol/L+高糖组细胞Runx2、IGF-1、Akt1的mRNA表达水平（24 h：0.34±0.02比0.62±0.09、0.64±0.05，0.34±0.01比0.77±0.03、1.02±0.07，0.15±0.02比0.24±0.08、0.4±0.09）、（48 h：0.72±0.03比1.27±0.02、1.37±0.02，1.09±0.07比2.44±0.19、2.73±0.04，0.38±0.04比0.86±0.06、1.43±0.03）均升高，差异有统计学意义（P < 0.05）。与对照组比较，高糖组细胞ALP、Akt1、IGF-1蛋白表达水平（48 h：1.00比0.72±0.02、1.00比0.89±0.03、1.00比0.09±0.01）均降低，差异有统计学意义（P < 0.05）；与高糖组比较，0.1 μmol/L+高糖组、1 μmol/L+高糖组和10 μmol/L+高糖组ALP、Akt1、IGF-1蛋白表达水平（48 h：0.72±0.02比1.92±0.02、2.30±0.30、3.09±0.10，0.89±0.03比1.50 ± 0.03、1.43±0.04、1.40±0.13，0.09±0.01比1.75±0.01、2.30±0.31、2.07±0.07）均升高，差异有统计学意义（P < 0.05）。

NG逆转高糖诱导的MC3T3-E1细胞活力减退；同时改善高糖的抑制作用，促进MC3T3-E1细胞IGF-1、AKt-1、Runx2 mRNA和IGF-1、AKt-1、ALP蛋白的表达。

探讨异基因造血干细胞移植后激素耐药胃肠道急性移植物抗宿主病（aGVHD）的影响因素。

回顾性分析西安交通大学第一附属医院2012年1月至2019年12月期间行异基因造血干细胞移植，术后发生胃肠道aGVHD 20例患者的临床资料。按照一线糖皮质激素治疗后的反应分为激素敏感组（13例）和激素耐药组（7例）。单因素Logistics回归分析患者性别、年龄、诊断、移植前微小残留病灶、移植类型、供者年龄、供受者关系、供受者ABO血型、输注单个核细胞数、CD34⁺细胞数、CD3⁺细胞数、中性粒细胞及血小板植入时间、CMV及EB病毒感染、胃肠道aGVHD发生的时间等与激素耐药胃肠道aGVHD的关系。观察激素耐药患者治疗后的转归，采用Kaplan-Meier生存分析激素耐药及敏感患者的预后差异。

20例胃肠道aGVHD患者中7例存在激素耐药。胃肠道GVHD发生时间<1个月，激素耐药的风险增加（OR = 13.500，95﹪CI = 1.197 ~ 152.211，P = 0.035），患者性别、年龄、诊断、移植前MRD、移植类型、供者年龄、供受者关系、供受者ABO血型、输注的单个核细胞、CD34⁺细胞、CD3⁺细胞、中性粒细胞和血小板植入时间、CMV和EB病毒感染均不影响激素耐药（P > 0.05）。7例激素耐药胃肠道aGVHD患者均接受二线CD25单克隆抗体治疗，治疗后5例有效，2例无效死亡。与激素敏感组比较，激素耐药组患者1年总生存率（64﹪比52﹪）降低及无进展生存率（28﹪比32﹪）升高，差异无统计学意义（P > 0.05）。

异基因造血干细胞移植后胃肠道aGVHD激素耐药可能与其发生时间相关，发生时间越早，越容易出现激素耐药。

探讨干扰FSCN1基因表达对前列腺癌细胞凋亡、活性氧（ROS）水平影响及机制。

以正常前列腺上皮细胞RWPE-1为对照细胞，通过RT-PCR及Western blot检测前列腺癌LNCaP、DU145和PC-3细胞中FSCN1 mRNA及蛋白表达；以Lipofectamine^TM 2000为载体，DU145细胞分为si-FSCN1组（靶向抑制FSCN1的小干扰RNAs转染DU145细胞）、阴性对照组（随机序列转染DU145细胞）及空白对照组（未转染的细胞），siRNA转染48 h，Western blot检测FSCN1、PCNA、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IKKα和p-IKKα的蛋白表达。CCK8检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率及ROS水平。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验。

与RWPE-1细胞比较，LNCaP、DU145和PC-3细胞中FSCN1 mRNA （1比2.561±0.189、7.183±0.882、4.796±0.567、4.796±0.567）及蛋白表达（0.053±0.007比0.217±0.013、0.654±0.058、0.316±0.035）均升高，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与阴性对照组比较，si-FSCN1组FSCN1表达（0.473±0.052比0.086±0.010）降低，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与si-FSCN1组比较，空白对照组、阴性对照组细胞活力（0.302±0.033比0.787±0.069、0.764±0.063）均升高，凋亡率（24.54﹪±1.47﹪比3.04﹪ ± 0.36﹪、3.28﹪±0.40﹪）和ROS相对荧光强度（90.04±5.73比47.88±3.62、49.62±4.11）均降低，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与si-FSCN1组比较，空白对照组、阴性对照组PCNA （0.255±0.032比0.654±0.062、0.631±0.058）、NF-κB p65 （0.092±0.011比0.296±0.032、0.318±0.037）、p-NF-κB p65 （0.042± 0.008比0.155±0.018、0.151±0.016）、IKKα （0.112±0.01比0.172±0.020、0.192±0.023）和p-IKKα的蛋白表达（0.051±0.005比0.102±0.011、0.091± 0.009）均升高，Cleaved caspase3蛋白表达（0.206±0.018比0.074±0.009、0.085±0.010）均降低，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。阴性对照组与空白对照组细胞活力、凋亡率、ROS水平及FSCN1、PCNA、Cleaved caspase3、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IKKα和p-IKKα的蛋白表达差异均无统计学意义（P > 0.05）。

干扰FSCN1基因表达可降低前列腺癌细胞活力及诱导凋亡，机制可能与ROS水平升高及NF-κB信号下调有关。

探讨miR-652-3p靶向同源异型核基因1（PRRX1）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌细胞凋亡的影响。

大鼠心肌细胞H9c2细胞采用正常培养基培养为对照组细胞，用含1 μmol/L AngⅡ的培养基培养为AngⅡ组细胞；分别转染miR-652-3p阳性对照序列（NC）和转染miR-652-3p mimics后用含1 μmol/L AngⅡ的培养基培养为AngⅡ+NC组和AngⅡ+miR-652-3p组细胞；将miR-652-3p mimics分别与PRRX1阳性对照质粒和PRRX1过表达质粒转染至H9c2细胞中用含1 μmol/L AngⅡ的培养基培养，分别为AngⅡ+miR-652-3p+ Vctor组和AngⅡ+miR-652-3p+PRRX1组细胞。实时荧光定量PCR （RT-qPCR）检测H9c2细胞中miR-652-3p表达水平，流式细胞术检测细胞凋亡，用Western blot检测细胞中PRRX1、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证H9c2细胞中miR-652-3p与PRRX1调控关系。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验。

与对照组比较，AngⅡ组H9c2细胞中miR-652-3p水平（1.00±0.08比0.21±0.05）、Bcl-2蛋白水平（0.83±0.08比0.40±0.04）均较低，而PRRX1蛋白水平（0.06±0.01比0.41±0.04）、凋亡率（5.02﹪±1.41﹪比25.33﹪±3.75﹪）、Bax蛋白水平（0.46±0.05比0.96±0.10）均较高，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与AngⅡ+NC组比较，AngⅡ+miR-652-3p组H9c2细胞中miR-652-3p的表达水平（0.24±0.06比0.98±0.07）、Bcl-2蛋白水平（0.38±0.04比0.72±0.07）均较高，而PRRX1蛋白水平（0.39±0.04比0.13±0.01）、凋亡率（27.02﹪±4.11﹪比12.19﹪±1.63﹪）、Bax蛋白水平（0.95±0.09比0.53±0.05）均较低，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与AngⅡ+miR-652-3p+Vctor组比较，AngⅡ+miR-652-3p+PRRX1组H9c2细胞凋亡率（12.88﹪±1.84﹪比25.45﹪±3.58﹪）、PRRX1蛋白水平（0.13±0.01比0.35±0.04）和Bax蛋白水平（0.54±0.05比0.82±0.08）均较高，差异具有统计学意义（P均< 0.05），而Bcl-2蛋白表达水平（0.72±0.07比0.46±0.05）降低，差异具有统计学意义（P < 0.05）。

AngⅡ能够下调心肌细胞中miR-652-3p的表达，上调miR-652-3p可通过靶向抑制PRRX1的表达减少AngⅡ诱导的H9c2细胞凋亡。

探讨紫草素对大肠癌（CRC）细胞LoVo的抗肿瘤作用及其机制。

以不同紫草素浓度梯度（0、2、4、6 μmol/L）处理CRC细胞LoVo 24 h，以4 μmol/L紫草素处理不同时间梯度（0、12、24、48 h）的CRC细胞LoVo。流式细胞技术结合Annexin V-FITC/PI双染色测定细胞凋亡率，Western blot检测细胞中caspase-9蛋白的表达及切割情况。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。

与0 μmol/L处理CRC细胞LoVo 24 h比较，2、4、6 μmol/L的细胞凋亡率[（6.94±1.02）﹪比（10.61±1.12）﹪、（15.55± 1.35）﹪、（36.51±1.46）﹪]均升高；与4 μmol/L紫草素处理0 h的CRC细胞LoVo比较，12、24、48 h的细胞凋亡率[（1.33±0.59）﹪比（19.23±1.24）﹪、（22.24±1.41）﹪、（28.41±1.52）﹪]均升高，差异具有统计学意义（P均< 0.001）。当紫草素剂量≥2 μmol/L，处理时间≥12 h时，caspase-9蛋白表达上调并被诱导活化，而caspase-9抑制剂（Z-LEHD-FMK）预处理后，LoVo细胞凋亡率下降38.7﹪，差异有统计学意义（P < 0.05）。

紫草素可以通过caspase-9蛋白的表达及其切割活性诱导CRC细胞凋亡。

探讨二氯乙酸（DCA）对人肾癌细胞株A498侵袭及迁移的影响，并分析其机制。

取人肾癌细胞株A498培养，分为阴性对照（等容积无菌生理盐水）组、DCA低、中、高（5、10、20 mmol/L）剂量组，培养48 h。Transwell小室实验检测侵袭能力，细胞划痕实验检测迁移能力，实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测c-Jun氨基末端激酶（JNK）、钙粘附蛋白E （E-cadherin）、N-钙粘蛋白（N-cadherin）基因表达，Western blot检测蛋白表达及磷酸化JNK （p-JNK）。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验。

与DCA高剂量组相比，DCA中、低剂量组、阴性对照组侵袭活性[（75.33 ± 10.09）比（167.89 ± 47.12）、（372.74 ± 50.06）、（530.26 ± 81.22）个/视野]、E-cadherin mRNA相对表达量（1.52 ± 0.12比1.35 ± 0.11、1.02 ± 0.11、0.85 ± 0.12）、E-cadherin蛋白相对表达量（1.32 ± 0.19比0.89 ± 0.14、0.37 ± 0.08、0.13 ± 0.03）均降低（P均< 0.001）；而迁移率[（10.05 ± 2.31）﹪比（23.95 ± 4.20）﹪、（36.26 ± 5.01）﹪、（53.59 ± 6.71）﹪]、N-cadherin mRNA蛋白相对表达量（0.42 ± 0.06比0.58 ± 0.07、0.80 ± 0.10、0.95 ± 0.11），N-cadherin蛋白相对表达量（0.15 ± 0.03比0.25 ± 0.04、0.74 ± 0.07、0.95 ± 0.11）、p-JNK水平（0.14 ± 0.03比0.29 ± 0.05、0.68 ± 0.07、0.95 ± 0.10）均升高（P均< 0.001）。不同剂量和阴性对照组的JNK mRNA与蛋白表达差异均无统计学意义（P > 0.05）。

DCA可抑制人肾癌细胞株A498侵袭及迁移，且一定范围内呈剂量依赖性，推测与调控侵袭及迁移相关基因与蛋白表达有关。

探讨阿加曲班对急性脑梗死大鼠脑组织细胞凋亡数量、caspase-3、Bcl-2和Bax表达的影响。

建立SD大鼠大脑中动脉缺血（MCAO）模型，将大鼠分为假手术组（Sham组，不插入MCAO拴线）、脑中动脉缺血模型组（MCAO组）和阿加曲班处理组（Argatroban组）。分别选取0、6和12 h共3个时间窗的样本进行检测，TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒检测大鼠脑部神经细胞凋亡，Western blot和ELISA法检测大鼠脑部caspase-3、Bax和Bcl-2水平。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。

TUNEL法结果显示，与MCAO组比较，Sham组和Argatroban组在0、6、12 h的细胞凋亡指数均降低[0 h（14.91±4.11）﹪比（2.13±0.58）﹪、（4.22±1.01）﹪；6 h（24.75±3.88）﹪比（3.19±0.28）﹪、（12.14±1.90）﹪；12 h（48.22±2.69）﹪比（5.75±1.21）﹪、（28.45±7.84）﹪，P均< 0.05]。ELISA结果显示：与Sham组比较，MCAO组0、6、12 h的大鼠脑组织细胞caspase-3、Bax表达均升高，而Bcl-2表达在6、12 h时升高（P均< 0.05）；与MCAO组比较，Argatroban组的脑组织细胞caspase-3、Bax表达均降低，而Bcl-2表达在6、12 h时升高[caspase-3表达：0 h （2.32±0.12）比（1.25±0.06）、6 h （5.91±0.60）比（3.26±0.22）、12 h（7.31±0.27）比（6.42±0.18）ng/ml；Bax表达：0 h（0.82±0.08）比（0.45±0.03）、6 h （1.00±0.05）比（0.66±0.04）、12 h （1.56±0.11）比（1.09±0. 07）ng/ml；Bcl-2表达：6 h （1.07±0.08）比（1.56±0.05）ng/ml，12 h （0.67±0.08）比（1.45±0.06）ng/ml，P均< 0.01]。Western blot结果显示，大鼠脑组织细胞caspase-3、Bax蛋白表达趋势与ELISA结果一致；而Bcl-2蛋白表达在Argatroban组高于Sham组和MCAO组，差异有统计学意义（P均< 0.01）。

阿加曲班可通过减少急性脑梗死诱导的大鼠脑组织细胞凋亡、抑制caspase-3和Bax表达，并上调Bcl-2水平而产生神经保护作用。